...酶的胰RNA酶），振荡，贮存于-20℃。（二）质粒DNA的大量制备（1）同上1.（1）（2）将1ml含菌液倒入含相应抗生素的Lb 100ml中，37℃振荡培养至A590=1.0(5～6h)。（3）加氯霉素（170μg/ml）扩增，37℃温箱...
...260nm紫外吸收值因而增加，这一现象称为增色效应（hyperchromic effect）。见图18-2。图18-2 DNA的增色反应如果升高温度使DNA变性，以温度对紫外吸收作图，可得到一条曲线，称为溶解曲线（见图18-3），由图可见当...
...变性，解离成单链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤中省略此步。（一）地高辛-碱性磷酸酶（Dig -AKP）标记DNA探针在石蜡包埋切片检测病毒DNA中的应用1．组织前处理...
...于是碱基外露，260nm紫外吸收值因而增加，这一现象称为增色效应（hyperchromic effect）。见图18-2。图18-2 DNA的增色反应如果升高温度使DNA变性，以温度对紫外吸收作图，可得到一条曲线，称为溶解曲线（见图18-3）...
...在各种自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮(SLE)等病人血清中常可检出抗脱氧核糖核酸(DNA)抗体，其中抗单链DNA(ssDNA)抗体可见于各种自身免疫病和结缔组织病人血液中，故无多大诊断特异性。但抗双链DNA(dsDNA)抗体主要见于...
...常用的探针标记法是缺口平移法(nicktranslation)，其原理如图13－1。首先用适当浓度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探针DNA双链上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，...
...以12000g离心5min。（8）小心吸尽上清液，将离心管倒置于一张纸巾上，再将附于管壁的液滴除尽。（9）用75%乙醇于4℃洗涤DNA，同上离心去上清真空抽干。（10）加50μl的1×TE（含20μg/ml无DNA酶的胰RNA酶），振荡，...
...DNA单链末端成为双链。如果供给32P标记的三磷酸核苷酸，则可使DNA带上同位素标记。当用交错切割的限制酶切成带有单链粘性末端的DNA片段，要用被切成平头末端的DNA片段连接时，可以先用Klenow片段使粘性末端的单链补齐成为平头，然后在...
...在各种自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮(SLE)等病人血清中常可检出抗脱氧核糖核酸(DNA)抗体，其中抗单链DNA(ssDNA)抗体可见于各种自身免疫病和结缔组织病人血液中，故无多大诊断特异性。但抗双链DNA(dsDNA)抗体主要见于...
...两个个体的基因组DNA是完全相同的。DNA的多态性虽可通过DNA测序检出，但用限制酶消化却是最常用的检测方法。1．RFLP由于碱基的变异可能导致酶切点的消失或新的切点出现，从而引起不同个体在用同一限制酶切时，DNA片段长度出现差异（图13－...
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