...以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆，在理论上是很简捷的，即用一种限制酶切割质粒DNA，然后在体外与外源，DNA（如干扰素基因，生长激素基因）相连接，再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌，以鉴定重组DNA。通常所用的质粒载体有pBR322...
...从生物组织细胞提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或YAC载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了...
...混合物全部平行地点加在变性聚丙烯酸受凝胶电泳板上进行电泳，每组制品中的各个组分将按其链长的不同得到分离，从而制得相应的放射性自显影图谱。从所得图谱即可直接读得DNA的碱基序列，见图24-3所示。图24－3 双脱氧链末端终止法测序基本原理...
...这是最容易连接的片段，如图24-1所示。将已经连接外源DNA的细菌质粒载体转化感受态的大肠杆菌，然后在含有AP等抗生素的平板上鉴定阳性重组体菌落，具体方法有：①检查α互补能力的丧失情况；②对小量制备的质粒DNA进行限制酶切的分析；③核酸杂交...
...不同策略。（一）外源DNA带有非互补突出端的片段用两种不同的限制酶分别消化质粒等载体和外源DNA，可以产生带非互补突出端的片段，这是最容易连接的片段，如图24-1所示。将已经连接外源DNA的细菌质粒载体转化感受态的大肠杆菌，然后在含有AP等...
...限制性内切酶作用部位（切点）也不同，这种酶切点只有4～6个核苷酸长度。因此来源于不同HLA单倍型的DNA可被一种内切酶切成不同长度的片段。在实际工作中，从细胞中提取基因组DNA（genomic DNA）的多态性比实际HLA-Ⅱ类抗原的多态性...
...混合物全部平行地点加在变性聚丙烯酸受凝胶电泳板上进行电泳，每组制品中的各个组分将按其链长的不同得到分离，从而制得相应的放射性自显影图谱。从所得图谱即可直接读得DNA的碱基序列，见图24-3所示。图24－3 双脱氧链末端终止法测序基本原理...
...短的重复顺序分别长16、17、32、33、37、41、62、64和376bp，但这些重复顺序几乎都共有一种“核心顺序”。“核心顺序”长10～15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针，同经限制性内切酶酶切的人体DNA作...
...RNA之间的碱基配对原由，A=U，T=A，C=G，合成与模板DNA序列互补的RNA链。④RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。⑤需要Mg2+或Mn2+离子。⑥并不需要引物。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性，所以没有校正功能。图17－2 ...
...短的重复顺序分别长16、17、32、33、37、41、62、64和376bp，但这些重复顺序几乎都共有一种“核心顺序”。“核心顺序”长10～15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针，同经限制性内切酶酶切的人体DNA作...
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