...近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进,重组DNA操作技术包括的范围不断扩大,DNA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。DNA克隆技术在动脉粥样硬化等疾病的病因...
...近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进,重组DNA操作技术包括的范围不断扩大,DNA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。DNA克隆技术在动脉粥样硬化等疾病的病因...
...以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆,在理论上是很简捷的,即用一种限制酶切割质粒DNA,然后在体外与外源,DNA(如干扰素基因,生长激素基因)相连接,再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌,以鉴定重组DNA。通常所用的质粒载体有pBR322...
...以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆,在理论上是很简捷的,即用一种限制酶切割质粒DNA,然后在体外与外源,DNA(如干扰素基因,生长激素基因)相连接,再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌,以鉴定重组DNA。通常所用的质粒载体有pBR322...
...示意图二、双脱氧链止终法测定战略由于DNA一般都由几千个单核苷组成。而目前测定DNA序列的最好方法,一次也只能测约600个核苷酸,因此进行DNA顺序测定前,需要用不同限制酶消化等测DNA,使其降成小片段,分别克隆到pUC1,18pUCl18,...
...示意图二、双脱氧链止终法测定战略由于DNA一般都由几千个单核苷组成。而目前测定DNA序列的最好方法,一次也只能测约600个核苷酸,因此进行DNA顺序测定前,需要用不同限制酶消化等测DNA,使其降成小片段,分别克隆到pUC1,18pUCl18,...
...与动脉粥样硬化 展望 (转基因动物在动脉粥样硬化研究中的应用)参考文献 第二十四章 DNA的克隆与序列测定 第一节 DNA的克隆 一、质粒或噬菌体载体与外源DNA的连接反应 二、大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 三、用M13噬菌体转染感受态...
...。(二)外源DNA带有相同末端(平端或粘端)的片段带有相同末端(平端或粘端)的外源DNA片段必须克隆到具有匹配末端的线状质粒或噬菌体载体中,在连接反应中,质粒或噬菌体载体可能发生自身环化,也可能形成串联寡聚物。因而,常常使用碱性磷酸酶去除5...
...分子杂交在临床微生物诊断上具有广阔的前景。细菌的基因组大小约5×106bp,约含3000个基因。各种细菌之间绝大部分DNA是相同的,要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后分别克隆得到...
...1.(美)J萨拇布鲁克,EF弗里奇,T曼尼阿蒂斯着,金科雁,黎孟枫等译,分子克隆实验指南,第二版,北京:科学出版社。19922.ThKohler ,D Labner,AK Rost ,et al.Quantiattion of mRNA ...
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