...基因工程又称遗传工程,是生物工程的主导技术。DNA重组技术或分子克隆是基因工程的核心。分子生物学研究中发现的许多核酸酶类都可用作基因工程的工具。其中能识别特定的回文序列并切割DNA双链的Ⅱ类限制性核酸内切酶在DNA重组技术中被广泛应用。...
...诺贝尔生理学或医学奖。后两位科学家因为1953年首 先在《自然》杂志上发表文章、提出DNA的双螺旋结构模型而享誉世界,而威尔金斯在这项伟大发现中的贡献却逐渐被人们遗忘。 1950年,当时在伦敦大学国王学院进行研究的威尔金斯利用刚刚发明的X...
...从免疫化学方面将冷球蛋白分为3种类型:Ⅰ型为单克隆冷球蛋白型,含有两种或两种以上单克隆抗体,包括有IgA、IgG和IgM;Ⅱ型为单克隆和多克隆的混合冷球蛋白型包括有IgM-IgG、IgA-IgG和IgG- IgG型等;Ⅲ型混合多克隆...
...数/1000细胞×100。计算分裂相时要注意掌握确定分裂相标准,其中主要是确定好划分间期和前期、末期和间期等的界限。另外,还有两个指标即接种存活率和克隆形成率,细胞接种存活率=形成克隆数/接种细胞数×100,细胞数接种率=贴壁存活细胞数/...
...一、常用动脉粥样硬化动物模型的比较动脉粥样硬化模型所用的动物有鼠、兔、猪、狗、猴,依上述理想动物模型的要求最常用的是兔、猪和鼠。各种动物诱导方法和形成特征的差异,见表22-1。表22-1 动脉粥样硬化模型的种类动物种类疾病诱导方法特征鸽...
...0.4ml5mol/L NaCl。(8)同上法用饱和酚、氯仿-异戊醇抽提,乙醇沉淀离心,弃上清。(9)75%乙醇洗涤2次,离心,弃上清,真空抽干。适量1×TE溶解,保存在4℃。六、转移基因最常用的将克隆重组的DNA片段导入哺乳动物细胞的方法是用...
...特别是体细胞杂交、分子杂交、DNA重组和DNA体外扩增(PCR)等技术后出现与应用,产生了许多定位新技术,如脉冲场凝胶电泳、染色体显微摄影、染色体步移和酵母人工染色体(YAC)克隆等,使基因定位的研究工作得到迅速发展。自1973年第一次国际...
...DNA参考物(pBR322DNA/HacⅢmarkers)、HhaⅠ,其余试剂均为分析纯。2.实验方法(1)引物的设计与合成:引物参考文献设计,由Ranson Hill Bio Ssience Inc合成。序列为P1:5’...
...特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组DNA文库所含的是带有含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中...
...70年代初有人在尸检材料中发现大多数动脉粥样斑块中只含有一种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的同功酶。如果一团组织细胞中只含一种这样的同功酶,就说明这些细胞是从一个细胞分裂增生来的。 动脉粥样斑块的这种“单克隆”性质提示,每一病损都可能分别由一个...
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