反转录PCR方法检测RNA_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...特定的RNA互补的cDNA提供了一条极为有利和有效的途径。RNA扩增包括两个步骤:①在单引物的介导下和逆转录酶的催化下,合成RNA的互补链cDNA;②加热后cDNA与RNA链解离,然后与另一引物退火,并由DNA聚合酶催化引物延伸生成双链靶...

http://qihuangzhishu.com/969/597.htm

再生式序列复制技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...RNA扩增过程与TAS相同。由于所使用的工具酶工作的适宜温度是37℃,所以只要在第一步变性、复性后,整个反应过程不再需要温度循环。具体方法如下:制备引物A、B,引物A有T7RNA多聚酶识别、结合位点。将引物、样本加入扩增缓冲液中,65℃,1...

http://qihuangzhishu.com/969/609.htm

DNA的序列测定_《动脉粥样硬化》_中医内科书籍_【岐黄之术】

...最多,最好的技术。一、Sanger双脱氧链终止法原理通常DNA的复制需要:DNA聚合酶,单链DNA模板,带有3'-OH末端的单链寡核苷酸引物,4种dNTP(dATP、dGTP、dTTP和dCTP)。聚合酶用模板作指导,不断地将dNTP加到...

http://qihuangzhishu.com/995/277.htm

DNA的序列测定_《动脉粥样硬化》在线阅读_【中医宝典】

...最多,最好的技术。一、Sanger双脱氧链终止法原理通常DNA的复制需要:DNA聚合酶,单链DNA模板,带有3'-OH末端的单链寡核苷酸引物,4种dNTP(dATP、dGTP、dTTP和dCTP)。聚合酶用模板作指导,不断地将dNTP加到...

http://zhongyibaodian.com/dongmaizhouyangyinghua/995-26-2.html

诊断_《基因诊断与性传播疾病》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...。④同样洗涤沉淀2次,收集沉淀。⑤ 加入50μl 蒸馏水,于55℃作用15min。⑥15000r/min离心2min,收集上清(含HCMV DNA),进行PCR扩增,将此悬液于100℃加热10min,并迅速于冰浴中冷却。(三)引物及探针引物...

http://qihuangzhishu.com/994/105.htm

基因异常与诊断方法的选用_《医学遗传学基础》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...许多疾病的遗传异质性,以及多数遗传的基因异常尚属未知,目前能直接诊断的病种虽日益增多,但仍然是比较有限的。表13-2 遗传的基因诊断方法基因异常方法探针、引物或限制酶基因缺失基因组DNA印迹杂交 PCR扩增缺失基因的探针 引物包括缺失或在...

http://qihuangzhishu.com/956/148.htm

基因诊断技术检测梅毒螺旋体_《基因诊断与性传播疾病》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...相区别,因为母亲的IgG可传递给胎儿。另外由于IgG终身存在,所以很难评价治疗结果。血清学诊断常常又存在着假阳性。PCR检测梅毒螺旋体DNA,特异性很强,敏感性很高,是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。(一)PCR引物的设计部位与序列:目前有...

http://qihuangzhishu.com/994/54.htm

多重PCR检测急性非淋巴细胞白血病IgH及TCRVγΙ-Jγ_肿瘤血液癌症_【中医宝典】

...17例。41例中ANLL FAB分型M11例,M212例,M3 7例,M4 8例,M5 10例,M6 2例,M7 1例。37例为初发病人,4例为缓解病人。 1.2寡核苷酸引物选择 利用计算机辅助设计分别对IgH、TCRγ链V区和J区共同...

http://zhongyibaodian.com/zhongliu/b38890.html

真核生物DNA复制的特点_《生物化学与分子生物学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...。polα和引物酶紧密结合,在DNA模板上先合成RNA引物,再由polα延长DNA链,这种活性还要复制因子C参与。同时结合在引物模板上的PCNA(增殖细胞核抗原Proliferating cell nuclear antigen)此时释放了...

http://qihuangzhishu.com/958/376.htm

PCR与原位杂交细胞化学结合法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...PCR技术的需要加入20PM一对应的引物(Primer),15μg PCR混合液含10μmol/l dATP、dCTP、dGTP和dTTP、50mmol/l KCl,10mmol/L Tris(pH8.3),2.5mmol/LMgCl2和...

http://qihuangzhishu.com/969/549.htm

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