非放射性标记的核酸探针_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

...放射性标记核酸探针在使用中的限制,促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展,在许多方面已代替放射性标记,推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术,即酶促反应标记和化学修饰标记。酶促反应标记探针是用缺口平移,随机...

http://zhongyibaodian.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-22-4.html

生物素随机引物标记探针方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...Bio-11-Dutp/dTTP(%)比值为35%时,其标记率最高,显色灵敏度达0.2pg,杂交灵敏度为1~2pg。二步法缺口平移标记HBv DNA探针,其灵敏度低于随机引物标记。Mackeg等(Focus,1992;14:21)证实了用...

http://qihuangzhishu.com/969/524.htm

核酸探针的非放射性标记技术_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...DNA的方法有缺口平移和随机引物延伸。3.寡核苷酸的生物素末端标记 有5’-磷酸的化学标记和3’-OH的酶促标记。前者将寡核苷酸的5’-磷酸接上一个乙二胺,然后用琥珀酰亚胺生物素,将生物素基团连接在磷酸酰胺基上。后者是用末端转移将...

http://qihuangzhishu.com/969/492.htm

关于探针的标记_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...生物素标记终止液:(四)DNA探针标记常用试剂的配制(1)10 ×缺口平移缓冲液:200mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2;100mmol/Lβ-巯基乙醇、1mg/ml BSA。(2)缺口平移反应终止液...

http://qihuangzhishu.com/969/666.htm

非放射性探针的显示体系_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...+ 底物显色 地高辛RPL酶标抗体 + 底物显色* :NT:缺口平移; PCR:聚合酶链反应;RPL: 随机引物标记; TL:末端标记4.非放射发光自显影若将AP或HRP的显色底物根据光化学原理换成一种酶解后产生光子的化合物,可用自显影技术...

http://qihuangzhishu.com/969/493.htm

概述_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...核酸序列,已广泛应用于临床检验和科学研究。Leary等(1983)用缺口平移标记的生物素DNA探针成功地用于Southern印迹杂交技术。Forst等(1985)发表了光敏生物素直接标记核酸的简便方法,使核酸和蛋白质的生物素标记探针技术前进...

http://qihuangzhishu.com/969/508.htm

概述_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

...核酸序列,已广泛应用于临床检验和科学研究。Leary等(1983)用缺口平移标记的生物素DNA探针成功地用于Southern印迹杂交技术。Forst等(1985)发表了光敏生物素直接标记核酸的简便方法,使核酸和蛋白质的生物素标记探针技术前进...

http://zhongyibaodian.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-22-1.html

限制性核酸内切酶的分类_《生物化学与分子生物学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...技术中最常用的工具酶酶主要用途限制性核酸内切酶识别DNA特定序列,切断DNA链DNA聚合酶Ⅰ或其大片段(Klenow)①缺口平移制作标记DNA探针②合成cDNA的第二链③填补双链DNA3’凹端④DNA序列分析耐热DNA聚合酶(Taq DNA...

http://qihuangzhishu.com/958/453.htm

核酸探针的标记和检测_《基因诊断与性传播疾病》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...标记技术有:缺口平移;DNA快速末端标记;用T4多核苷酸酶标记DNa5'末端,随引物延伸;聚合酶链反应。核酸探针的非放射性标记技术有:光促生物素标记核酸、酶促生物素标记核酸、寡核苷酸的生物素末端标记、酶标DNA、酶标寡核苷酸、DNA半抗原标记。...

http://qihuangzhishu.com/994/11.htm

基因诊断的原理_《医学遗传学基础》在线阅读_【中医宝典】

...常用的探针标记缺口平移(nicktranslation),其原理如图13-1。首先用适当浓度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探针DNA双链上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNa poly merasⅠ)的5’→3’的外切酶活性,...

http://zhongyibaodian.com/yixueyichuanxuejichu/956-15-1.html

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