nick translation法,标记DNA 探针 . 缺口翻译法或 切口平移 法是实验室最常用的一种 脱氧核糖核酸 探针标记法。利用 E.coli DNA 多聚酶 I的多种酶促活性将标记的dNTP掺入到新合成的DNA链中从而形成高比活性的均匀标记的DNA探针。线状、 超螺旋 及带缺口的环状双链DNA均可作为 缺口平移 法的模版。 基本原理： 以限量的DN...
在适当的浓度的DNase I作用下在一双链DNA上制造一些缺口，再利用大肠杆菌DNA聚合酶I 的5’—3’外切酶活性依次切除缺口下游的核酸序列，同时将四种脱氧三磷酸核苷（其中一种用放射性标记）利用该酶5’—3’聚合活性补人缺口，使缺口逐个平称并在平移过程中形成标记的新生核酸链。此法也适用于探针的非放射性标记。如 32 P标记DNA探针（缺口平移法）：反应体积...
...l (pH7.5)150μl,2.5倍体积的95%乙醇，置液氮中15min或-20℃过夜。15000r/min，离心10min，真空干燥后，溶于适量三蒸水中，即为纯化的探针，-20℃备用。 使用闭环或线性双链质粒DNA，或分离的双链DNA片段均可进行此法标记，全质粒标记敏感性较高，因为标记物可同时掺入载体DNA。 此法也可用于放射性同位素和地辛标记DNA法。
配穴法 ， 针灸 临床治病时 穴位 相互配合的方法。常用的有： 前后配穴法 、 俞募配穴法 、 表里配穴法 、 原络配穴法 、 远近配穴法 、 子母 配穴法等。详各条。
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