最常用的单链噬菌体载体是M13和它的改建噬菌体。M13是丝状噬菌体,有长约6500个核苷酸的闭环DNA基因组。M13附着在大肠杆菌的F性菌毛上,所以它们只能感染雄性细菌,即F’或Hfr细菌。当噬菌体进入细菌细胞后,单链的噬菌体DNA转变成双链复制型(RF)。从细胞中分离的RF可用作克隆双链DNA的载体。当每个细菌细胞里 积聚 了200到300份RF型拷贝时,...
营养期噬菌体 vegetative phage 指在寄主细胞内繁殖中的 噬菌体 形态。特别是在与成熟的噬菌体和 原噬菌体 区别时而使用此词。一般在噬菌体繁殖时,它并不作为噬菌体粒子,而是一当在各结构成分合成后,才聚集起来成为具有侵染能力的噬菌体粒子。
噬菌体λ是最主要的一种载体。自从1974年以来,已用野生型λ改造和构建出一系列噬菌体载体。 噬菌体λ是温和噬菌体。基因组是长约50kb的双链DNA分子。在噬菌体λ颗粒中,DNA是线状双链分子带有单链的互补末端。末端长12个核苷酸,这称为粘性末端,简写COS。当噬菌体感染宿主细胞后,双链DNA分子通过COS而成环状。在感染早期,环状DNA分子进行转录。在此期间...
野生型噬菌体λDNA全长约50kb,上有65种限制酶酶切点,除ApaⅠ、NaeⅠ、NarⅠ、NheⅠ、Sna BⅠ、XbaⅠ和XhoⅠ等7种限制酶各有一个切点外,其余都多于2个。有些酶切点在λ增殖所必需的基因区域内。因此,噬菌体λ必须经过改造才能用作载体。现在用的λ载体大都除去了某种限制酶的酶切点。因此,作为载体的噬菌体λ都短于野生型。 噬菌体λ载体有两种类...
细菌转化的方法多以Mendel和Higa(1970)的发现为基础,其基本方法是用冰预冷的CaCl 2 或多种2价阳离子等处理细菌,使之进入感受态得以转化。 用CaCl 2 制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞,常用于成批制备感受态细菌。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。 1.从37℃培养16~20h的新鲜平板中挑取一个单菌落(如...
大肠杆菌噬菌体 相关问题 大肠杆菌噬菌体的基本性质具体是什么?它能被哪些有机溶剂灭活?能抵抗哪些有机溶剂?需要了解这些知识。 大肠杆菌噬菌体Coliphage 大肠杆菌噬菌体是人体的 大肠 内的一种 噬菌体 ,只能在人的大肠内,若在其他部位,就会导致诱发一种病。噬菌体还有一个特点就是具有 专一性 ,一种噬菌体只在一种 细菌 中生活,而不能在另一种细菌中生活,...
噬菌体 是能 感染 细菌 、 放线菌 、 真菌 、 螺旋体 的 病毒 。噬菌体分布广泛,凡是有细菌存在的场所,就可能有相应噬菌体的存在。噬菌体有严格的 宿主 特异性,只寄居于易感宿主菌体内。 在电镜下噬菌体有三种外形, 蝌蚪 形、微球形和线形。大多数噬菌体呈蜊蚪形,由 头部 和尾部两部分组成(图4-1)。但也有无尾的噬菌体。较大的噬菌体头部的形状常为六棱柱体...
转染 转染 (transfection)采用与 质粒 DNA转化 受体 细胞 相似的方法,即 宿主 菌先经过CaCl2, 电穿孔 等处理成 感受态 细菌 ,再将 重组 噬菌体 DNA直接导入受体细胞,进入感受态细菌的噬菌体DNA可以同样复制和繁殖,这种方式称为转染。转染是转化的一种特殊形式。 简介 转染(transfection)指 真核细胞 由于外源DNA...
噬菌体是能感染细菌、放线菌、真菌、螺旋体的病毒。噬菌体分布广泛,凡是有细菌存在的场所,就可能有相应噬菌体的存在。噬菌体有严格的宿主特异性,只寄居于易感宿主菌体内。 在电镜下噬菌体有三种外形, 蝌蚪 形、微球形和线形。大多数噬菌体呈蜊蚪形,由头部和尾部两部分组成(图4-1)。但也有无尾的噬菌体。较大的噬菌体头部的形状常为六棱柱体,头部含有核酸,外围绕一层蛋白质...
噬菌体 (phage)是 感染 细菌 的一类 病毒 ,有的噬菌体 基因组 较大,加入λ噬菌和T噬菌体等;有的则较小,如M13、f1、fd噬菌体等。用感染 大肠杆菌 的λ噬菌体改造成的载体应用最为广泛。 λ噬菌体由头和尾构成,其基因组是长约49kb的线性双链 DNA 分子 ,组装在 头部 蛋白质 外壳内部,其序列已被全部测出。λ噬菌体感染时,通过 尾管 将基因...
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