1.感受态细胞的制备 (1)用JM101或TG1等菌的培养菌液在M9基本培养基平板上的划线培养,于37℃温育24~36h。 (2)批量制备冻存的感受态细胞的方法,同大肠杆菌感受态细胞的制备。 2.用M13噬菌体转染感受态细胞 (1)用2×YT或SOB培养液于37℃持续地振摇,将用于铺平板的细胞(JM101或TG1等)培养过夜。 (2)从-70℃以下冰箱中取出...
细胞 处于能够吸收DNA的状态称 感受态 ,处于感受态的细胞称作 感受态细胞 。 受体 细胞经过一些特殊方法(如:CaCl2,RuCl等 化学 试剂 法)的处理后, 细胞膜 的通透性发生变化,成为能容许多有外源DNA的载体 分子 通过的感受态细胞。 例如 野生型 E.coli并不容易转化,这是由于 细菌 产生一种酶能迅速降解进入的外源DNA。经过多年的努力,...
噬菌体 是 病毒 的一种,其特别之处是专以 细菌 为宿主,较为人知的噬菌体是以 大肠杆菌 为寄主的 T4型噬菌体 。 跟别的病毒一样,噬菌体只是一团由 蛋白质 外壳包裹的遗传物质,大部分噬菌体还长有“尾巴”,用来将遗传物质注入宿主体内。超过95%已知的噬菌体以双螺旋结构的 DNA 为 遗传物质 ,长度由5个 碱基对 到500个千碱基对不等;余下的5%以 RN...
根据与 宿主 菌的相互关系, 噬菌体 可分成两种类型:一种是能在宿主菌细胞内复制 增殖 ,产生许多 子代 噬菌体,并最终裂解 细菌 ,称为毒性噬菌体(virulent phage)。另一种是噬菌体 基因 与宿主菌 染色体 整合,不产生子代噬菌体,但噬菌体DNA能随细菌DNA复制,并随细菌的分裂而 传代 ,称为 温和噬菌体 (temperate phage)或...
1.感受态细胞的制备 (1)将1ml过夜培养的细菌(如DH52、TG1、TM101)接种于100ml2×YT培养于500ml烧瓶。于37℃刷烈振荡,通常≥200rpm培养的细菌密度约OD550=0.2~0.5(5×10 7 cells/ml),需2~4h。 (2)将培养物放于冰上致冷10min,于4℃离心细菌培养物,10000rpm离心10min。 (3)弃...
噬菌体 分类 分类“噬菌体”的页面 此分类包含下列4个页面,共有4个页面。 单 单链噬菌体 原 原噬菌体 毒 毒性噬菌体 温 温和噬菌体
温和噬菌体 或称 溶源性噬菌体 ,指噬菌体 感染 细胞 后,将其 核酸 整合(附着)到 宿主 的核DNA上,并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制,在一般情况下,不引起宿主细胞裂解。 噬菌体侵染宿主后,并不 增殖 ,裂解,而与宿主DNA结合,随宿主DNA复制而复制,此时细胞中找不到形态上可见的噬菌体,这种噬菌体称为温和性噬菌体。含有温和性噬菌体的 细菌 称...
单链噬菌体 single stranded phage 含 单链 核酸 的 噬菌体 。其中包括以f2为代表的RNA噬菌体,以φX174为代表的球状DNA噬菌体,以fd为代表的纤维状DNA噬菌体。
原噬菌体 (prophage):某些 温和噬菌体 侵染 细菌 后,其 核酸 整合到 宿主 细菌 染色体 中。处于 整合状态 的 噬菌体 DNA称为原噬菌体。它是繁殖和传递噬菌体本身 遗传信息 的一重要方式。
转导噬菌体 transducing phage指进行性状 转导 的 噬菌体 。可组入寄主 细菌 的 染色体 片断,由 感染 而传给 受体菌 。具有这种能力的通常为 溶原性 噬菌体。在特殊转导时,噬菌体 基因 的一部分组入其他DNA(转导片断),但作为其 代偿 ,对噬菌体 增殖 所必需的基因缺失者,称为缺陷型转导噬菌体(defective transducin...
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