Kbaffan等（1986）首先创立了蓝色荧光素标记和染色技术，可进行双标记或多标记。 （1）取7-氨基-4-甲基香豆素（7-amino-4-methyl coumarin, AMC）260μg溶于二甲亚砜25μl中。 （2）将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液（0.5mol/L,pH8.5,内含50～100mg IgG）中，室温反应2h，过Sepha...
荧光素 是具有光致荧光特性的染料， 荧光染料 种类很多 种类 目前常用于标记 抗体 的荧光素有以下几种。 异硫氰酸荧光素 (fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和 酒精 溶剂。有两种 异构体 ，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与 蛋白质 结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，...
荧光素 是具有光致荧光特性的染料， 荧光染料 种类很多 种类 目前常用于标记 抗体 的荧光素有以下几种。 异硫氰酸荧光素 (fluorescein isothiocyanate, FITC) FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和 酒精 溶剂。有两种 异构体 ，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与 蛋白质 结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，...
以荧光物标记 抗体 进行 抗原 定位的技术。 荧光抗体技术 在临床检验上已用作 细菌 、 病毒 和 寄生虫 的检验及 自身免疫病 的诊断等。在细菌学检验中主要用于菌种的鉴定。 标本 材料可以是 培养物 、 感染 组织、病人分泌 排泄物 等。本法较其他鉴定细菌的 血清学 方法速度快、操作简单、敏感性高，但在细菌实验诊断中，一般只能作为一种补充手段使用，而不能代...
1．Marsshall 氏法 （1）材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/l pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶（25～50ml）、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等。 （2）方法及步骤： ①抗体的准备：取适...
...放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。 取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液，边加入边搅拌，在0～4℃中结合12～18h，再用生理盐水透析5～7h，经葡聚糖凝胶G-50柱层析，除去游离荧光素，分装，贮存于4℃备用。
...入5～20μg）溶于二甲亚砜（1mg/ml）,取此溶液300μl，一滴一滴加入蛋白质溶液中，同时电磁搅拌。 （3）在室温中搅拌2h，避光。 （4）把结合物移入直径3cm,高30cm大小的Bio –Gel P-6层析柱（用0.01mol/l pH8.0的PBS平衡过），流速为1.5ml/min。 （5）收集先流出的红色结合物，即为标记抗体，分装，4℃保存备用。
用 荧光素 、 同位素 或 酶标记 抗体 或 抗原 ，用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的 标记物 与抗原或抗体 化学 连接之后不改变后者的 免疫 特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。 1． 免疫荧光技术 免疫荧光技术（immunofluorescencetechni）是用化学方法使荧光素标记的抗体（或抗原）与组织或 细胞 ...
在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时，要进行双重荧光染色，一般均采用直接法，将两种荧光抗体（如抗A和抗B）以适当比例混合，加在标本上孵育后，按直接法洗去未结合的荧光抗体，抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记，发黄绿色荧光；抗B抗体用TMRITC或RB200标记，发红色荧光，可以明确显示两种抗原的定位。
角膜 、 结膜 上皮 损伤或有 溃疡 时，可被 荧光素 染色 ，方法是点 无菌 的1%荧光素液于 结膜囊 内，然后用 生理盐水 冲洗，亦可用玻璃棒蘸少量药液于结膜囊内，进行观察。此时可见角膜、结膜破损处有嫩绿色着色，上皮完整处不染色。如有 角膜瘘 ，点荧光素后作轻压 眼球 ，可见角膜表面布满黄绿色荧光素，而在瘘管处则有液体流出，状如清泉外流。操作时注意勿污染...
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