1．感受态细胞的制备 （1）用JM101或TG1等菌的培养菌液在M9基本培养基平板上的划线培养，于37℃温育24～36h。 （2）批量制备冻存的感受态细胞的方法，同大肠杆菌感受态细胞的制备。 2.用M13噬菌体转染感受态细胞 （1）用2×YT或SOB培养液于37℃持续地振摇，将用于铺平板的细胞（JM101或TG1等）培养过夜。 （2）从-70℃以下冰箱中取出...
...一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl等 化学 试剂 法）的处理后， 细胞膜 的通透性发生变化，成为能容许多有外源DNA的载体 分子 通过的感受态细胞。 例如 野生型 E.coli并不容易转化，这是由于 细菌 产生一种酶能迅速降解进入的外源DNA。经过多年的努力，科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源DNA的效率。那就是用化学方法处理细胞，使其改变膜对D...
...）。噬菌体的整个感染过程非常迅速；以T4噬菌体为例，从注入病毒 核酸 到释放出超过300个新合成的病毒，所需的时间仅为20多分钟。 细菌防御噬菌体的主要方法是合成能够降解外来DNA的酶。这些酶被称为限制性内切酶，它们能够剪切噬菌体注入细菌细胞的病毒DNA。细菌还含有另一个防御系统，这一系统利用 CRISPR序列 来保留其过去曾经遇到过的病毒的基因组片断，从而...
...包括吸附、穿入、 生物合成 、成熟和释放几个阶段。从噬菌体吸附至细菌溶解释放出子代噬菌体，称为噬菌体的复制周期或 溶菌 周期。 吸附 吸附是噬菌体与细菌表面 受体 发生特异性结合的过程，其特异性取决于噬菌体 蛋白 与宿主菌表面受体分子结构的互补性。不同噬菌体的吸附方式不同，丝形噬菌体以其末端吸附，有尾噬菌体以尾丝、尾刺吸附。丝形噬菌体如M13、f1等及微球形...
...离心10min。 （5）弃上清，悬浮细菌于原始培养体积的1/15的50mMCaCl和10mMTris·HCl（pH8.0）无菌冷冻中。此时的细胞是感受态细胞，即可用于转化。200μl分装于无菌的1.5ml微量离心管中，贮存于-80℃冰箱中。 2．转化程序 （1）取出200μl感受态细胞慢慢使其溶化，并立即放于冰上，加入DNA或连接反应混合物，DNA量通常≤5...
噬菌体 分类 分类“噬菌体”的页面 此分类包含下列4个页面，共有4个页面。 单 单链噬菌体 原 原噬菌体 毒 毒性噬菌体 温 温和噬菌体
温和噬菌体 或称 溶源性噬菌体 ，指噬菌体 感染 细胞 后，将其 核酸 整合（附着）到 宿主 的核DNA上，并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起宿主细胞裂解。 噬菌体侵染宿主后，并不 增殖 ，裂解，而与宿主DNA结合，随宿主DNA复制而复制，此时细胞中找不到形态上可见的噬菌体，这种噬菌体称为温和性噬菌体。含有温和性噬菌体的 细菌 称...
单链噬菌体 single stranded phage 含 单链 核酸 的 噬菌体 。其中包括以f2为代表的RNA噬菌体，以φX174为代表的球状DNA噬菌体，以fd为代表的纤维状DNA噬菌体。
原噬菌体 (prophage)：某些 温和噬菌体 侵染 细菌 后，其 核酸 整合到 宿主 细菌 染色体 中。处于 整合状态 的 噬菌体 DNA称为原噬菌体。它是繁殖和传递噬菌体本身 遗传信息 的一重要方式。
转导噬菌体 transducing phage指进行性状 转导 的 噬菌体 。可组入寄主 细菌 的 染色体 片断，由 感染 而传给 受体菌 。具有这种能力的通常为 溶原性 噬菌体。在特殊转导时，噬菌体 基因 的一部分组入其他DNA（转导片断），但作为其 代偿 ，对噬菌体 增殖 所必需的基因缺失者，称为缺陷型转导噬菌体（defective transducin...
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