聚合酶链反应（PCR）或称体外基因倍增技术，它利用一对位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物，在DNA聚合酶的介导下，经过多次变性，退火和延伸过程的重复性循环，大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时，经PCR反应产生的靶DNA片段均参入了标记物，用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好，简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度，可以大...
...重复上述过程15次。最后将反应管置65℃水浴5min。反应完成，加入酵母tRNA10μg。分别测定参入和游离放射性计数，参入率为97.4%。标记DNA探针经醋酸钠酒精沉淀回收。将沉淀溶于10mmol/l Tris—HCl 、EDTA(pH8.0)100μl。用PCR方法标记的DNA探针特异性高，敏感性好，可测出的最低靶DNA量为10fg,利用PCR还可以作D...
...（V/V）甲酰胺溶于4×SSC预热37℃15～45min 。 （11）杂交：将载片上过量的甲酰胺液倾去，加20μl杂交混合液（含放射性同位素标记的探针量为5×10 3 ～ 10 6 cpm/每张载片）。覆以硅化的盖玻片，置于盛有少量5×SSC的硬塑料盒内以保持湿度，42℃孵育12～18h。为使载片不致于浸泡于SSC溶液内，通常以二根玻管（或棒）扎成担架状，载...
超氧化物歧化酶 （Orgotein），商品名 奥古蛋白 。可用于 前列腺癌 或 膀胱癌 放射治疗 后遗症 、 类风湿性关节炎 。 本药品被归类到 肌肉关节痛 等药品分类。 服用超氧化物歧化酶须注意的事项 注射后少数可出现局部疼痛、 荨麻疹 和 蛋白尿 等反应。 超氧化物歧化酶的用法用量 注意：同种药品可由于不同的包装规格有不同的用法或用量。本文只供参考。如果...
超氧化物歧化酶 （Orgotein），商品名 奥古蛋白 。可用于 前列腺癌 或 膀胱癌 放射治疗 后遗症 、 类风湿性关节炎 。 本药品被归类到 肌肉关节痛 等药品分类。 服用超氧化物歧化酶须注意的事项 注射后少数可出现局部疼痛、 荨麻疹 和 蛋白尿 等反应。 超氧化物歧化酶的用法用量 注意：同种药品可由于不同的包装规格有不同的用法或用量。本文只供参考。如果...
在大肠杆菌T 4 噬菌体多聚核苷酸激酶（T 4 PNK）的催化下，将γ- 32 P-ATP上的磷酸连接到寡核苷酸的5’末端上。要求标记的寡核苷酸5’端必须带羟基。反应式为： 此法适用于标记合成的寡核苷酸探针。如将底物改为Bio –11 –dUTP，也可以在3’端标记上一个生物素。 寡核苷酸 35 S的3’—末端标记法：将下列液体依次加入Eppendorf管中...
...物。在光学显微镜下观察时，要求反应的终末产物是不溶性的有色物质，具有可观察性。在电镜下观察时，则要求底物的终末产物具有较高的电子密度。由于 辣根 过氧化物酶（Horse Radish Peroxidase, HRP）具有稳定性强和反应特异性高等优点，是目前应用最多的酶标记物。实验方法包括酶标记抗体法、非标记抗体酶法和非标记的过氧化物酶—抗过氧化物酶技术（即P...
...次固定液，过夜。 （2）随后，作10～40μm的冰冻切片，放入第一抗体血清作用12～18h，4℃，用含蔗糖的PBS洗数次。 （3）置于HRP标记抗体液（第二抗体）4 ℃ 过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜。 （4）2.5%戊二醛（pH7.4磷酸缓冲液）再固定1h，4 ℃ 用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛，每次5min，共洗3次。 （5）D...
核酸外切酶 （exonuclease）在 核酸 水解酶 中，是具有从 分子 链的末端顺次水解 磷酸二酯键 而生成单 核苷酸 作用的酶，与 核酸内切酶 相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的3′端生成5′- 单核苷酸 的酶，及水解5′端生成3′-单核苷酸的酶。前者有 蛇毒磷酸二酯酶 及 大肠杆菌核酸外切酶 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有 脾脏 磷酸二酯酶 、 嗜酸乳杆菌 （...
核酸外切酶 （exonuclease）在 核酸 水解酶 中，是具有从 分子 链的末端顺次水解 磷酸二酯键 而生成单 核苷酸 作用的酶，与 核酸内切酶 相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的3′端生成5′- 单核苷酸 的酶，及水解5′端生成3′-单核苷酸的酶。前者有 蛇毒磷酸二酯酶 及 大肠杆菌核酸外切酶 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有 脾脏 磷酸二酯酶 、 嗜酸乳杆菌 （...
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