血清载脂蛋白(Apo)包括ApoAⅠ、AⅡ、B 100 、CⅡ、CⅢ、E和(a),已属常规检测项目。血清中载脂蛋白均结合于脂蛋白中,测定时要加用解链剂,使脂蛋白中Apo暴露再进行测定。 目前测定血清中Apo的含量的方法是利用相应特异抗体试剂进行测定。现有羊抗人ApoAⅠ、AⅡ、B 100 、CⅡ、CⅢ、E和(a)等抗体试剂。测定原理是将某一特异抗体加到待测 ...
抗原免疫动物产生的抗体是血清γ-球蛋白的一部分。抗体的理化性质及结构与γ-球蛋白相近似。γ-球蛋白是一组结构相似,但又有差异的蛋白质,通称为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig),按其结构和免疫化学性质的差异,又可分为五类,分别称为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。载脂蛋白抗体以IgG最为稳定。因载脂蛋白的体液中含量不同以及分离纯化的难易的差...
...Ⅴ分别代表Kringle-5功能区;P代表蛋白酶功能区。血纤维蛋白溶酶原与Apo(a)各功能区的相似程度(%)标记在图B的下部。(源自:Ichinose A. Biochemistry31:3115,1992 and Mclean et al. Nature 330:136,1987.) 四、人体载脂蛋白基因结构一览表 表4-1列出所有已经鉴定的人体载脂蛋白...
大部分人体载脂蛋白基因的染色体定位采用了两种方法:DNA印迹法(Southern blotting);荧光标记原位杂交法(fluorescence insitu hybridization)。DNA印迹法主要是分析从人与老鼠或中国苍鼠体细胞杂交体中提取的DNA。如果人体某种载脂蛋白cDNA或基因DNA探针仅与含有特定人体染色体的体细胞杂交体DNA杂交,且不与...
...,一般多用终点法。 4.酶联免疫法(enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA) 该技术已广泛应用于极微量蛋白的定量测定,可测出ng级水平的抗原或抗体含量,该法可用于ApoE、C-Ⅱ、C-Ⅲ等含量较少的载脂蛋白的定量测定。 5.放射免疫法(radioimmunoassay,RIA) 该法灵敏,抗血清用量少,所需设备较多,一般...
载脂蛋白分离纯化后,获得了所需要的纯品,该纯品纯度及其品种可通过下述方法进行鉴定。 一、免疫电泳法 免疫电泳法既可用于鉴定蛋白种类,又可鉴定其纯度。 制备1%的琼脂糖,以0.1mmol/L巴比妥缓冲液(0.05μ,pH8.6)为溶剂,制作一块约7×4cm的大小,厚度为0.2~0.3cm的琼脂糖凝胶,以 玻璃 板或薄膜为支持物,于凝胶正中打孔(直径0.2cm)...
蛋白质多态性(proteinpolymorphism)指一种蛋白质存在多种不同的变型,这些变型的产生是由于同一基因位点内的突变,产生复等位基因,导致合成不同类型的蛋白质, 人类 蛋白质的多态性往往和人种及其地理分布有关。在目前已发现的近20种载脂蛋白中,ApoAⅠ、AⅡ、AⅣ、CⅡ、CⅢ、E及Apo(a)等存在明显的多态性,这些载脂蛋白可以以分子大小/电荷互...
...结构基因或其调控区DNA序列的突变引起致 高脂血症 或早发 动脉粥样硬化 已大量见诸于医学文献。新的载脂蛋白基因的多态性不断地被发现。 检测载脂蛋白基因的遗传变异通常使用从外周血白细胞中提取的DNA为起始材料,通过聚合酶链反应扩增基因DNA的产量,嗣后,或采用变性梯度凝胶电泳(denaturing gradientgel electrophoresis, D...
...apolipoproteins as discriminators for presnce and severityof angiographically defined coronary artery disease.Atherosclerosis,1983,49:1 11.周新,张华征,殷以礼等,抗人载脂蛋白B血清的制备及其临床应用,中华心血管病杂专,1...
载脂蛋白CⅢ基因位于11号染色体与载脂蛋白AⅠ-AⅣ形成一基因族,它位于载脂蛋白AⅠ下游,有三个内含子和四个外显子。目前对载脂蛋白CⅢ基因3'末端非编码区C-G对换产生一个Sac-Ⅰ酶切位点与 冠心病 的关系未有定论。用多聚酶链反应(PCR)扩增载脂蛋白CⅢ基因3'末端233bp,再用Sac-1酶切扩增产物,可以检测载脂蛋白CⅢ基因3'末端的突变及其与 动脉...
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