(一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
不论使用何种制备方法,要获得合格的标记化合物,都必须将反应物经过仔细的分离、纯化。另外,一些标记化合物,经过一定时间的存放后,往往会出现不纯物,而需再纯化。如碘标记生长激素( 125 --HGH),在刚标记的第2天,从Sephadex G-100过滤谱上可见,几乎所有的碘化HGH都集中在峰II;保存1个月后,峰II组份减少,峰I和峰III成分明显增加,峰I是...
放射性标记核酸探针在使用中的限制,促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展,在许多方面已代替放射性标记,推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术,即酶促反应标记法和化学修饰标记法。 酶促反应标记探针是用缺口平移法,随机引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程...
在研究心血管疾病时,主要运用显微注射法、基因打靶或基因剔除等方法制备各种TGM模型。 1.显微注射法 Gordon等人首次成功地将含有HSV和SV 40 DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内,得到了带有这种外源DNA顺序的TGM。1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”(supermouse)曾引起整个生物学界的轰...
1 空白 海藻 酸钙微囊制备工艺的研究为形成光滑饱满、圆整而又具有高载药的微囊,需考查的主要因素包括: 海藻 酸钠黏度与浓度;氯化钙浓度; 钙化 时间和滴制工艺参数,如滴制针头的大小、滴制速率、滴头高度(液滴出口到液面间的距离) 。以下对些影响因素分别进行微囊成型性的单因素考察。1.1 海藻酸钠浓度与黏度 分别考察7 种海藻酸钠样品,不同浓度(0.5 % ,...
亚硫酸氢钠 穿心莲 内酯的制备 1 取穿心莲内酯100g, 加95%乙醇1500L加热溶解。 2 取1mol/L的Na2so4 400ml, 加2%H2SO4 480ml混合,加水至800ml。 3 将穿心莲内酯溶液倒入(2)液中,摇匀,加热回流30’后,加2%H2SO4使PH6-7, 回收乙醇至无醇味,用等体积氯仿提取3次,分出水层,并蒸出水至小体积。加醇...
...gG、IgA、IgM、IgD和IgE。载脂蛋白抗体以IgG最为稳定。因载脂蛋白的体液中含量不同以及分离纯化的难易的差别,可分别采用多克隆抗体制备法和单克隆抗体制备法。 1.多克隆抗体的制备 (1)抗原 目前所知的载脂蛋白进入异种机体后,能致敏淋巴细胞,与抗体产生特异性结合复合物,即具备有抗原性。抗原性包括免疫原性和抗原特异性两方面的含义。载脂蛋白因具备抗原特...
放射性标记核酸探针在使用中的限制,促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展,在许多方面已代替放射性标记,推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术,即酶促反应标记法和化学修饰标记法。 酶促反应标记探针是用缺口平移法,随机引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
...生理学和 心血管 医学名词。是 血浆 中的 蛋白质 所形成的 渗透压 ,包括 白蛋白 、 球蛋白 、 纤维蛋白原 ,其中最主要的是白蛋白。 胶体渗透压 对维持 血管 内外的水平衡起重要作用。 与之相对的是血浆 晶体渗透压 ,后者主要有电解质产生,在血浆渗透压中所占比例较大。 因为血浆中的蛋白质 分子 较大,不易通过 毛细血管 ,所以胶体渗透压维持着血管内外的...
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