...要分析研究的微量、混杂的目的基因易于纯化，得以增量，便于分析。 外来基因引起细胞生物性状改变的过程叫转化（transformation），以噬菌体把外源基因导入细菌的过程叫转染（transfection）。利用载体（噬菌体或病毒）把遗传物质从一种宿主传给另一种宿主的过程叫转导（transduction）。一个或一组基因从一处转移到基因组另一处的过程叫转位（t...
以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆，在理论上是很简捷的，即用一种限制酶切割质粒DNA，然后在体外与外源，DNA（如干扰素基因，生长激素基因）相连接，再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌，以鉴定重组DNA。 通常所用的质粒载体有pBR322、pUC18、pUC19等，噬菌载体有M13噬菌体载体等。 图24-1 质粒载体的定向克隆 一、质粒或噬菌体载体与外源D...
...or TM5.0分析DNA，Assemblylign TM排列出各片段的位置，进而排出DNA的全序列。 三、双脱氧链终止法测定方法 以M13噬菌体为载体的双氧链终止法的实施步骤为例： 1．M13噬菌体复制型双链DNA（RFDNA）的制备。 为了将待测双链DNA进行克隆，必须制备M13mp18或M13 mp19复制型（闭环双链）DNA，从M9培养基中，挑起单个...
...or TM5.0分析DNA，Assemblylign TM排列出各片段的位置，进而排出DNA的全序列。 三、双脱氧链终止法测定方法 以M13噬菌体为载体的双氧链终止法的实施步骤为例： 1．M13噬菌体复制型双链DNA（RFDNA）的制备。 为了将待测双链DNA进行克隆，必须制备M13mp18或M13 mp19复制型（闭环双链）DNA，从M9培养基中，挑起单个...
...or TM5.0分析DNA，Assemblylign TM排列出各片段的位置，进而排出DNA的全序列。 三、双脱氧链终止法测定方法 以M13噬菌体为载体的双氧链终止法的实施步骤为例： 1．M13噬菌体复制型双链DNA（RFDNA）的制备。 为了将待测双链DNA进行克隆，必须制备M13mp18或M13 mp19复制型（闭环双链）DNA，从M9培养基中，挑起单个...
...转录酶催化合成DNA，则此DNA序列与mRNA互补，称为互补DNA或cDNA。提取出组织细胞的全部mRNA，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库，基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在...
...体通常根据待克隆的 DNA片段长度来选择。在制作原核生物基因文库时，因基因组较小，可把 DNA片段切得短些，可选用 质粒 如pBR322等作载体。真核生物的基因内部常有称为 内含子 的非编码区，使一个天然基因的长度比实际编码的部分要长得多，基因文库中待克隆的 DNA片段便应长些，以保证得到完整的基因。通常采用的载体有经过改建的 噬菌体 如λCharon4A（...
单链DNA （single－stranded DNA）大部分 DNA 以双螺旋结构存在，但一经热或碱处理就会变为单链状态。单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、 碱基 反应性质等方面都和双链DNA不同。某些 噬菌体 粒子内含有单链环状的DNA，这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。
单链DNA （single－stranded DNA）大部分 DNA 以双螺旋结构存在，但一经热或碱处理就会变为单链状态。单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、 碱基 反应性质等方面都和双链DNA不同。某些 噬菌体 粒子内含有单链环状的DNA，这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。
...提取出全部DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将DNA降解成预期大小的片段，然后将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或YAC载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体，就称为基因组...
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