原位杂交免疫细胞化学技术存在的难点之一是实验手续繁琐,实验周期长。国外Liesi等(1986)和国内学者何彬等应用光敏生物素-链亲合素(Biotin-streptavidin)胶体金系统进行原位杂交,得到了快速满意的结果,全部实验可在数小时内完成。 作用把含某种多肽或蛋白的cDNA片段的质粒,按照第十九章 在光照下标记光敏生物素,然后经DNA酶消化1h,得到...
1.缺口平移 该技术由Kelly等于1970年创立。其原理是首先用DNA酶在双链DNA探针分子的一条链上制造一些缺口(nick ),缺口处会形成3’—羟基末端,这时再在大肠杆菌DNA聚合酶I的催化下将核苷酸残基加在3’-羟基上,同时,根据大肠杆菌酶DNA聚合酶I的5’→3’核酸外切酶活性,此酶将缺口5’侧核苷酸依次切除。其结果是在缺口平移(nick tr-a...
...缔组织、脂肪组织、肌肉、血管、滑膜、周围神经以及骨组织等。本节 研究的对象为来源于这些组织的肿瘤,与一些与之相关但组织发生尚不太明了的肿瘤的免疫细胞化学标记。软组织恶性肿瘤虽然只占人体全部恶性肿瘤的1%左右。但由于这类肿瘤形态很相似。在常规切片下确定其组织发生,常是临床病理诊断中的难题之一,为病理工作者所关注。由于免疫细胞化学的发展,研制成许多标记抗体,提供...
免疫化学 immunochemistry 以 抗体 的结构, 抗原抗体反应 的物理化学分析, 补体 的结构和作用,各种 抗原 的化学分析,以及参与 免疫 的 分子 的结构和机能为研究对象的科学。
用免疫细胞化学方法可以检测任何一种细菌和病毒,其突出的优点是快速、敏感、简便,又能同时进行形态学鉴定。此外,它还可更广泛地使用已知抗原间接法检查血清中抗体帮助诊断。更多地应用单克隆抗体进一步提高特异性和应用的广泛性。
(一)纤维组织与纤维组织细胞性肿瘤免疫细胞化学标记 纤维组织肿瘤缺少专一性抗体标记。特别分化较低的 纤维肉瘤 ,一般应用Masson或Van Gieson染色,再用肌源性抗体等排除法来确诊,对双向分化的 恶性纤维组织细胞瘤 ,应采用纤维与组织细胞两种标记抗体。即可应用Vimentin和抗胰蛋白酶或抗糜蛋白酶抗体标记取得满意的结果,如果是多形性恶性纤维组织细胞...
...中常见的 白色念殊菌 抗原,检查病人或病兽的粪便中的轮状病毒,自病人标本中检查 甲肝病毒 、 疱疹病毒 、 麻疹病毒 、流感、呼吸道融合及巨细胞病毒等。还可用于植物组织浆液中检查植物病毒。此外尚试用于测钩体抗原及血吸虫病的循环抗原等。在免疫化学方面可用于检测白蛋白,免疫球蛋白的各种组份,也可用于检测补体成份,如:ciq,还能用于检测蛇毒。 检查抗体方面:用E...
...中常见的 白色念殊菌 抗原,检查病人或病兽的粪便中的轮状病毒,自病人标本中检查 甲肝病毒 、 疱疹病毒 、 麻疹病毒 、流感、呼吸道融合及巨细胞病毒等。还可用于植物组织浆液中检查植物病毒。此外尚试用于测钩体抗原及血吸虫病的循环抗原等。在免疫化学方面可用于检测白蛋白,免疫球蛋白的各种组份,也可用于检测补体成份,如:ciq,还能用于检测蛇毒。 检查抗体方面:用E...
此法标记原理如下图所示: 标记的HRP部分催化底物化学发光反应:氨基苯二甲酰肼 氨基苯二甲酸 +N 2 +光→X-光片上感光10~20min显定影。 光亮子在酚、萘及胺类等增强剂促进下,而使光亮增强。 这种方法就是利用特殊的酶底物,氧化后把产生的能量转变为光能放出,称为化学发光。杂交后与探针结合的酶催化相应的发光剂,经增强剂将光能放大,在X光片上显示杂交信号...
...;③肌无力白纤维骨骼肌抗体;④肌无力骨骼肌红纤维抗体。 (7)人结肠;抗结肠粘膜抗体。 (8)胰腺:胰腺细胞抗体。 (9)肾上腺:肾上腺皮质细胞抗体。 (10)神经组织:根据需要将多种抗原组合。 按间接法进行检测,如发现某种自身抗体,再作滴度测定,这是一种联合筛选试验,十分简便,已作常规应用。 7.微波增敏快速自身抗体检测方法近年微波技术用于免疫组织化学检测...
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