抗淋巴细胞抗体检测步骤: 用塑制免疫反应板,每孔依次加入液体石蜡5 μl,患者血清1 μl,正常人淋巴细胞悬液1 μl,置20 ℃温箱30 min,再加新鲜兔补体5 μl置温箱60 min,然后加伊红-Y 2.5 μl染色3~5 min,再以37%甲醛3 μl固定5 h以上。每孔平行检测3次,最后在相位差显微镜下观察结果。 判断标准: 1、阴性: 在相位差显...
抗淋巴细胞抗体检测步骤: 用塑制免疫反应板,每孔依次加入液体石蜡5 μl,患者血清1 μl,正常人淋巴细胞悬液1 μl,置20 ℃温箱30 min,再加新鲜兔补体5 μl置温箱60 min,然后加伊红-Y 2.5 μl染色3~5 min,再以37%甲醛3 μl固定5 h以上。每孔平行检测3次,最后在相位差显微镜下观察结果。 判断标准: 1、阴性: 在相位差显...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
用人肾(新鲜手术或尸检6h以内)采用肾皮质或大白 鼠肾 脏冰冻切片不需任何固定,作检查AMA抗体的抗原底物,间接免疫荧光结果可见远端肾小管上皮细胞浆呈现均匀的荧光。Walker等(1965)首先用此法在原发性 胆汁 性 肝硬化 ,隐原性肝 硬化 和慢性活动性 肝炎 中发现AMA,以 原发性胆汁性肝硬化 (158例/188例)阳性率最高(84%),由于阻塞性肝...
在单克隆抗体问世前,ICC染色中通常所用的抗血清均为多克隆抗体,即抗血清含有多少B淋巴细胞株所分泌的抗体,这些抗体的性质不完全相同,不同的抗血清之间可能有交叉反应,使ICC染色受到一定限制。近年,单克隆抗体的引入,特别是市售单克隆抗体和种类和数量的迅猛发展,及各实验者比较容易制备自己所需的单克隆抗体,为ICC染色在特殊抗原定位、生物活性检测、肿瘤标记识别中,...
... 、脉络视 网膜炎 等,重者 流产 或 死胎 。围生期感染症状较轻。儿童或成人感染是通过密切接触和性接触传播。输血感染可引起异嗜性和EB病毒抗体阴性的 传染性单核细胞增多症 及 肝炎 等。免疫力低下者,如肿瘤、器官移植、 艾滋病 等,可以引起潜伏的CMV激活,导致全身严重的CMV感染,表现为间质性 肺炎 、肝炎,并可导致死亡。此外,CMV还可能有致癌作用。其...
... 、脉络视 网膜炎 等,重者 流产 或 死胎 。围生期感染症状较轻。儿童或成人感染是通过密切接触和性接触传播。输血感染可引起异嗜性和EB病毒抗体阴性的 传染性单核细胞增多症 及 肝炎 等。免疫力低下者,如肿瘤、器官移植、 艾滋病 等,可以引起潜伏的CMV激活,导致全身严重的CMV感染,表现为间质性 肺炎 、肝炎,并可导致死亡。此外,CMV还可能有致癌作用。其...
用于 软组织肿瘤 可在石蜡切片表达的抗体已有多种,请参见表12-1。 表12-1 软组织细胞可用的标记抗体 抗原名称 标记细胞 (1)角蛋白(Keratin) 上皮与肌上皮细胞 (2)波纹蛋(Vimentin) 间叶分化细胞、内皮细胞 (3)结蛋白(Desmin) 肌组织分化细胞 (4)肌动蛋白(Actin) 肌细胞,肌上皮细胞,肌纤维 (5)肌浆球蛋白(M...
培养细胞经促细胞分裂剂刺激,核内DNA开始合成G 0 期,到最大增殖期(S期),细胞核特异的出现DNA的复制,利用这一特点,制成抗原DNA聚合酶S的辅助蛋白。取培养细胞或人末稍血淋巴细胞经PHA,ConA刺激后涂片,间接免疫荧光检测。结果可PHA刺激后48hDNA合成开始的S期出现很强的斑点型荧光,(G)期细胞无反应。 在SLE病 人血 清中出现有特异性诊断...
...嘌呤鸟嘌呤核糖转移酶,故不能生长繁殖,而杂交瘤细胞具有上述两种酶,在HAT选择培养液可以生长繁殖。 在用HAT选择培养1~2天内,将有大量瘤细胞死亡,3~4天后瘤细胞消失,杂交细胞形成小集落,HAT选择培养液维持7~10天后应换用HT培养液,再维持2周,改用一般培养液。在上述选择培养期间,杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时,即可开始检测特异性抗体,筛选出所需要...
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