在研究心血管疾病时,主要运用显微注射法、基因打靶或基因剔除等方法制备各种TGM模型。 1.显微注射法 Gordon等人首次成功地将含有HSV和SV 40 DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内,得到了带有这种外源DNA顺序的TGM。1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”(supermouse)曾引起整个生物学界的轰...
免疫原是诱导机体产生抗体、并能与抗体发生反应的物质。能否制得合格的抗体由许多因素决定,而能否制备合格的免疫原则是其前提条件。而且作为诊断试剂的抗原也必须是单一特异性的,即纯化的抗原。自然众多的物质皆可成为免疫原,但绝少是单一成分(除非是合成的基因工程制备的),所以必须将某个抗原从复杂的组分中提取出单一的成分。下面介绍有代表性的免疫原制备方法。
探针制备就是目的基因的标记,核酸标记方法常用的有缺口平移法、随机引物法、末端标记法等。标记物质有放射性元素(如 32 P等)和非放射性物质(如生物素、地高辛等)。 32 P是最常用的核苷酸标记同位素,被标记的dNTP本身就带有磷酸基团,便于标记,特点是比活性高,可达9000Ci/mmol;发射的β射线能量高,可达1.70MeV,用它标记的探针自显影时间短,灵...
...的应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高其分辨率,即向电镜水平发展。Jacob(1971)首先用 3 H标记的核酸RNA探针与DNA杂交并在电镜水平显示获得成功,继后不少科技工作者在这方面做了大量的工作(Manning et al 1975,Steinert et al19...
ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下叙述这些试剂的原料和制备方法。 (一)固相载体 可作ELISA中载体的物质很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。在ELISA测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学...
此部分内容包含以下子章节,请点击标题阅读: 标本采集的意义及原则 标本采集法 血液标本采集法 尿标本采集法 粪便标本采集法 痰标本采集法 分泌物培养标本采集法
原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外,又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
....0] , 观察指标。由实验可知, 合适的比例在2.0∶1.0~1.0∶2.0。1.1.4 基质与药物的比例: 将姜黄素与基质按不同比例混合制备滴丸, 其他条件固定观察指标。由实验可知,合适的比例范围在2.0∶1.0~4.0∶1.0。1.1.5 药液温度( 药液滴制时的温度) : 改变药液温度, 其他条件不变。由实验可知, 药液温度偏低, 滴丸在冷凝液中冷凝...
...gG、IgA、IgM、IgD和IgE。载脂蛋白抗体以IgG最为稳定。因载脂蛋白的体液中含量不同以及分离纯化的难易的差别,可分别采用多克隆抗体制备法和单克隆抗体制备法。 1.多克隆抗体的制备 (1)抗原 目前所知的载脂蛋白进入异种机体后,能致敏淋巴细胞,与抗体产生特异性结合复合物,即具备有抗原性。抗原性包括免疫原性和抗原特异性两方面的含义。载脂蛋白因具备抗原特...
1 空白 海藻 酸钙微囊制备工艺的研究为形成光滑饱满、圆整而又具有高载药的微囊,需考查的主要因素包括: 海藻 酸钠黏度与浓度;氯化钙浓度; 钙化 时间和滴制工艺参数,如滴制针头的大小、滴制速率、滴头高度(液滴出口到液面间的距离) 。以下对些影响因素分别进行微囊成型性的单因素考察。1.1 海藻酸钠浓度与黏度 分别考察7 种海藻酸钠样品,不同浓度(0.5 % ,...
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