蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳。由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有：醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳。由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。常用的电泳技术有：醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
...列，同时将四种脱氧三磷酸核苷（其中一种用放射性标记）利用该酶5’—3’聚合活性补人缺口，使缺口逐个平称并在平移过程中形成标记的新生核酸链。此法也适用于探针的非放射性标记。如 32 P标记DNA探针（缺口平移法）：反应体积为25μl，内含0.3μgDNA片段，4μl 0.2μmol/L dNTP, 1.1×10 6 Bq [α- 32 P]dATP,1μl2万...
此法具有标记率高、反应体积小（3ml水平）、可用低浓度的 125 I原料、对多肽激素和蛋白质的免疫活性损失小、稳定等优点，系常规的碘化方法之一。 1．原理 用Iodogen为氧化剂，对蛋白质和多肽抗原进行碘化标记，把 125 I直接引进分子中的酪氨酸残基上。标记过程中被标记样品不与Iodogen混合，标记后取出样品即停止反应，不使用任何还原剂。 2．方法 （...
...泳（boundaryelectrophoresis）之后，电泳技术才开始应用。本世纪60-70年代，当滤纸、 聚丙烯酰胺凝胶 等介质相继引入电泳以来，电泳技术得以迅速发展。丰富多彩的电泳形式使其应用十分广泛。电泳技术除了用于小分子物质的分离分析外，最主要用于蛋白质、 核酸 、酶，甚至 病毒 与 细胞 的研究。由于某些 电泳法 设备简单，操作方便，具有高分辨率...
...的 核酸 。琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离 同工酶 及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下： ⒈ 琼脂糖凝胶电泳 的原理概述琼脂糖是由琼脂分离制备的链状 多糖 。其结构单元是D- 半乳糖 和3.6- 脱水 -L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型 凝胶 。因此该凝胶适合于 免疫复...
...t P-40）40℃，进行检测系统的显示如荧光-亲合素标记，过氧化物酶-亲合素标记等。 总之，自Gall 和Pardue 1969年建立杂交免疫细胞化学以来的20余年中，已有不少新的改良的方法出现，但基本原则仍为Gall和Pardue所建立的相仿。作者个人体会是任何方法需在本人的实验实践中加以体验和改良。比如目前对乙酰基化作用，即浸入醋酸酐和三乙醇胺是否能减...
...酶（T 4 PNK）的催化下，将γ- 32 P-ATP上的磷酸连接到寡核苷酸的5’末端上。要求标记的寡核苷酸5’端必须带羟基。反应式为： 此法适用于标记合成的寡核苷酸探针。如将底物改为Bio –11 –dUTP，也可以在3’端标记上一个生物素。 寡核苷酸 35 S的3’—末端标记法：将下列液体依次加入Eppendorf管中。 寡核苷酸（1 pmol）1μl ...
...in），地高辛（Digoxigenin），汞（mercury），溴（bromine）和碱性磷酸酶等，其中目前应用最多的是生物素和地高辛。将此法与免疫组化PAP法或ABC法联合使用，能成功地显示一些神经肽mRNA和神经肽的共存与共同分布。向正华等发现碱性磷酸酶抗地高辛抗体是经 木瓜 蛋白酶处理的，只有抗体的Fab段没有Fc段，而免疫细胞化学（Immunocyt...
...例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性；②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后，与组织成分结合，可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上，发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法（Enzyme Bridge Method）和过氧化物酶抗过氧化物酶法（PeroxidaseAntiperoxidase Method, PAP法）。现分述如下。
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