...的反应条件下,加入的已知抗体(或抗原)的浓度一定,反应产生的免疫复合物多少与待检样品中含有相应抗原(或抗体)量成正比。也就是抗体浓度一定时,免疫复合物越多则样品中的抗原量也越多。可用实验性标准曲线推算出样品中抗原(或抗体)的含量。如免疫单向扩散试验、免疫比浊试验和酶联免疫检测等都属于这类方法。 (2)抗原或抗体效价滴定的原理:当抗原抗体复合物形成多少不能反应...
...性成正比。 2.细胞增殖法CSF的依赖株很多,如GN-CSF的依赖细胞株是DA3.15,M-CSF依赖细胞株是M14,G-CSF依赖株是NES60.4。待测样品与相应细胞株共同培养后,用 3 H-TdR掺入法或MTT法测定,根据依赖株细胞的增殖情况,检测不同CSF的生物活性。 此外,也可用免疫学检测法和分子生物学检测法,其检测原理与检测其它细胞因子基本相同。
T细胞具有多种生物学功能,如直接杀伤靶细胞,辅助或抑制B细胞产生抗体,对特异性抗原和促有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等,据此建立了一系列的检测方法,其中有些已用作临床检测细胞免疫功能的指标。
...液中获取,也可从肺灌洗液或患者腹膜透析液中分离,但操作繁锁,得量不多。许多实验室在进行基础或配合临床研究巨噬细胞功能及其与疾病的关系、或筛检免疫增强药物和探讨其作用机制时,常选用小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,常用的检测方法如下。 (一)炭粒廓清试验 正常小 鼠肝 中枯否细胞可吞噬清除90%炭粒,脾巨噬细胞约吞噬清除10%炭粒,据此给小鼠定量静脉注射印度墨汁(炭...
一、特异性抗原的检测 检测人T细胞的特异性抗原,曾采用抗人脑、抗人胸腺细胞和抗人T细胞等抗血清,通过细胞毒试验或免疫荧光染色加以鉴定。自抗白细胞分化抗原的单克隆抗体问世以来,上述诸多方法均被新方法取而代之。常用以鉴定和检测计数T细胞的表面分化抗原如表21-1所示。 表21-1 T胞表面主要CD抗原及其特异性 CD抗原 特 异 性 CD2 E受体、全部T细胞和...
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
...分子较大,仅当靶细胞膜完全被破坏时才释放,故不能较早地反映效应的功能。 (三)荧光法 检测原则是用荧光素标记靶细胞,经与效应细胞共温后,离心法上清,用荧光计检测剩余的活靶细胞的荧光,缺点是活细胞释放的荧光常被效应细胞和培养液等所粹灭。另外,荧光分析法常遇细胞自然释放率高,荧光本底强,影响灵敏度。为克服上述障碍,用时间分辨荧光免疫分析,将靶细胞用镧系元素铕(E...
...性,也可藉以鉴定和计数各阶段B细胞在人外周血和淋巴样组织的分布以及疾病时的变化动态,为临床提供诊治相关疾病的有用信息。 一、B细胞表面抗原的检测 B细胞表面有CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原,其中有些系全部B细胞所共有,而有些仅活化B细胞所特有,据此可用相应的CD系列单克隆抗体,通过间接荧光免疫法、酶免疫组化或ABC法加以检测。健康...
确定免疫复合物病的直接证据不是检出CIC,而是在病变部位查到固定的IC沉积。在一些自身免疫病和免疫复合物病,例如 系统性红斑狼疮 、部分肾小球肾炎、 类风湿性关节炎 、 结节性多动脉炎 和寻常型 天疱疮 等,组织沉积免疫复合物的检出对疾病的诊断和发病机制的研究都比CIC的检出更有意义。 检测组织沉淀免疫复合物常用免疫组织化学技术,首先从适当的病理部位采取组织...
...上都是Arg;E 2 都是Cys;112位为Cys和158位是Arg者为ApoE3异构体,见图3-3所示,自然人群中,基因频率ε3分布最高,ApoE3/3表型分布约70%。 图3-3 人ApoE三种主要异构体的氨基酸残基及基因密码的改变位置 由于ApoE多态性具有生物学重要性,对ApoE多态性的研究是目前医学的热门话题。ApoE表型和基因型的检测方法很多,多...
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