载脂蛋白分离纯化后,获得了所需要的纯品,该纯品纯度及其品种可通过下述方法进行鉴定。 一、免疫电泳法 免疫电泳法既可用于鉴定蛋白种类,又可鉴定其纯度。 制备1%的琼脂糖,以0.1mmol/L巴比妥缓冲液(0.05μ,pH8.6)为溶剂,制作一块约7×4cm的大小,厚度为0.2~0.3cm的琼脂糖凝胶,以 玻璃 板或薄膜为支持物,于凝胶正中打孔(直径0.2cm)...
一、ApoAⅠ ApoAⅠ是HDL的主要蛋白,占HDL总蛋白的70%。1989年由美国Breslow实验室首先将编码 人类 ApoAⅠ的基因分别整合到小鼠及大鼠的基因组内。ApoAⅠ在小鼠和大鼠体内的增强表达选择性地升高了血浆HDL胆固醇(HDL-C)水平。这项观察与人群研究结果一致,表明血浆ApoAⅠ浓度与HDL-C水平正相关,同时也提示可以采用升高血浆A...
血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目,其临床意义主要是:①早期发现与诊断 高脂蛋白血症 ;②协助诊断 动脉粥样硬化 症;③评价动脉粥样 硬化 疾患如 冠心病 脑梗塞 等危险度;④监测评价饮食与药物治疗效果。 血浆脂蛋白测定分离的常用方法有超速离心法、沉淀分离法、电泳分离法及免疫分离法。根据脂蛋白分离纯化或定性定量等不同的需要可以选择不同的方法,如...
脂蛋白是由脂质和蛋白质组成的复合物。在脂蛋白内的脂质与蛋白质之间没有共价键结合,多数是通过脂质的非极性部分与蛋白质组份之间以疏水键相互作用而结合在一起。因此脂蛋白的物理特性与其所含的脂质组成和蛋白性质密切相关,如图2-1所示。
脂蛋白的物理学特性与它们的脂质组成和含量密切相关,脂蛋白包含各种脂质分子,脂蛋白内的中性脂质含量增高则脂蛋白颗粒的密度下降。而脂蛋白的化学和生物学特性与其所含的载脂蛋白密切相关,因此我们用表2-2列出几种主要的脂蛋白的化学组成。 表2-2 人血 浆脂蛋白的化学组成 总脂蛋白的重量百分比 CM VLDL LDL HDL 2 HDL 3 蛋白质 2.0 10 2...
脂蛋白受体主要包括乳糜粒受体(CM-R)、极低密度脂蛋白受体(VLDL-R)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、高密度脂蛋白受体(HDL-R)和清道夫受体(scavenger receptor)等。脂蛋白受体的检测与一般受体检测方法的原理及操作基本类同。目前研究最多,应用最广的要属LDL-R,其他脂蛋白受体如清道夫受体、VLDL-R等的检测方法与LDL-R基本...
临床上对脂质代谢紊乱的认识与血浆脂质及脂蛋白、载脂蛋白的测定方法的发展密不可分。50年代只能测定血浆胆固醇的含量以确诊高胆固醇血症。到60年代初期血浆甘油三酯测定方法的应用,使研究者把 高脂血症 分为三种:高胆固醇血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症合并高甘油三酯血症。60年代纸上电泳技术得到改进,提高了对血浆脂蛋白的分辨力和检出率。可将血浆脂蛋白分为α-脂蛋...
脂类在血液中以脂蛋白形式进行运送。并可与细胞膜上存在的特异受体相结合,摄取进入细胞内进行代谢。迄今为止,报道的受体已有很多种,研究最详细的是LDL受体,其次是清道夫受体,再就是VLDL受体,这三种受体的氨基酸序列。构象及与配体的结合部位都已阐明,并且已成功地得到cDNA。Brown和Goldstein于1974年研究 家族性高胆固醇血症 (familial ...
一、ApoAⅠ ApoAⅠ是HDL的主要蛋白,占HDL总蛋白的70%。1989年由美国Breslow实验室首先将编码 人类 ApoAⅠ的基因分别整合到小鼠及大鼠的基因组内。ApoAⅠ在小鼠和大鼠体内的增强表达选择性地升高了血浆HDL胆固醇(HDL-C)水平。这项观察与人群研究结果一致,表明血浆ApoAⅠ浓度与HDL-C水平正相关,同时也提示可以采用升高血浆A...
...在氨基酸编码子以外的区域,称为“中性”变化,不导致临床疾病的发生。但是,基因的氨基酸编码区以及基因表达的调控区的DNA序列改变时有发生。导致蛋白质的合成量改变或基功能的异常。载脂蛋白结构基因或其调控区DNA序列的突变引起致 高脂血症 或早发 动脉粥样硬化 已大量见诸于医学文献。新的载脂蛋白基因的多态性不断地被发现。 检测载脂蛋白基因的遗传变异通常使用从外周血...
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