为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞 125 I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用 125 I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成纤维细胞)、组织或含有LDL-R的制剂一起孵育,使LDL-R与 125 I-LDL充分结合,形成受体-配体复合物,再除...
鲜姜提取物的制备方法包括将鲜姜榨汁,在每千克鲜姜汁中加入固体试剂10~80克,组成以鲜姜汁为液相、以固体试剂为固相的液-固萃取体系,在10~80℃对鲜姜汁进行萃取2~20小时,沉淀,分离沉淀物,干燥,即可获得具有鲜姜天然活性和天然风味的鲜姜提取物(挥发油和姜辣素混合物)。所用固相试剂是淀粉,糊精,纤维素等。该方法工艺和设备简单,同时完成鲜姜复杂活性成分的提取...
胶体铁的等电点为7.8至7.9,在pH7.4时通过离子键能与抗体IgG(pH5.8~7.3)结合而不影响抗体活性,在此条件下,Seno'对Hale'胶体铁进行了抗体标记,并成功用于免疫细胞化学染色(Seno,et al.1989),抗体标记时,用0.1mol/L碳酸钾将胶体的pH调至7.4按每毫升脱体铁0.2~1mg的蛋白量,将IgG在电磁搅拌下逐滴加入到胶...
为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞 125 I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用 125 I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成纤维细胞)、组织或含有LDL-R的制剂一起孵育,使LDL-R与 125 I-LDL充分结合,形成受体-配体复合物,再除...
金属类标记物的免疫标记法同切片免疫染色,即将标记物与抗体相结合,通过直接或间接法显示抗原部位。胶体金可与蛋白A相结合后与IgG分子中的Fc 段相结合。哪与卵白素(a-vidin)相结合可与结合抗体的生物素(biotin)反应。免疫金银染色法在胶体金标记后,再进行银液显影。病毒(包括噬菌体)标记物多采用不标记抗体法,即搭桥法。此法的原理是采用同种动物制备抗原的...
在将Taq DNA 聚合酶 引入PCR反应,并使之达到自动化之后,PCR反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单,而且,许多PCR的失败都归因于 标本 的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用,因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外,处理标本可使待 扩增 DNA暴露,能与 引物 复性 。关于PCR标本制...
胶体磨 由不锈钢、半不锈钢胶体磨组成,胶体磨的基本原理是流体或半流体物料通过高速相对连动的定齿与动齿之间,使物料受到强大的剪切力,磨擦力及高频振动等作用,有效地被粉碎、 乳化 、均质、温合,从而获得满意的精细加工的产品。 胶体磨结构特点:分式、卧式两种规格。其主机部份由壳体、定子、转子、调节机构、冷却机构、电机等组成。其主要零件均采用不锈钢制造,耐腐蚀,无毒...
自旋标记 spin label 自旋标记 spin label 很多物质的 分子 不表现 电子自旋共振 (ESR),但对这些分子,人工地使之与 自由基 (free radical)结合从而得以用ESR法来研究,获得独特的ESR信息,这就是 自旋标记法 。因自由基有不成对电子自旋,所以称自旋标记(H.M.McConnell)。开始是用 氯丙嗪 阳离子自由基研究...
为了研究抗体的理化性质、分子结构与功能,以及应用抗体于临床疾病的诊断、治疗及预防都需要人工制备抗体。目前,根据制备的原理和方法可分为多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体三类。
(1)透析除盐:蛋白质溶液内应除去多余的电解质,不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位,影响蛋白质的吸附,因此,标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水(0.005mol/l NaCl , pH7.0)透析。 (2)去除蛋白质中的沉淀:长期低温保存的蛋白质或4 ℃ 较长时间保存的抗体,特别是在浓度高于2mg/...
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