光敏生物素有一个连接臂，一端连接生物素，另一端有芳基叠氮化合物。在可见光照射下，芳基叠氮化合物可能变成活化芳基硝基苯，很易与DNA或RNA的腺嘌呤N—7位置特异结合，大约每50个碱基结合一个生物素，所以只用于标记大于200个核苷酸的片段。光敏生物素的醋酸盐很易溶于水，与核酸形成的共价结合很稳定。此法有以下优点：方法简便易行，快速省时，不需昂贵的酶和dUTP等...
（一） DNA 探针 DNA探针是最常用的 核酸 探针，指长度在几百 碱基对 以上的双链DNA或 单链DNA 探针。现已获的DNA探针种类很多，有 细菌 、 病毒 、 原虫 、 真菌 、动物和人类 细胞 DNA探针，这类探针多为某一 基因 的全部或部分序列，或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的，如细菌的 毒力 因子 基因探针 和人类ALU探针，这些DN...
最常用的同位素是α- 32 PdNTP, 3 HdNTP,及 35 SdNTP，多用缺品平移法、末端标记法，随机引物延伸法和反转录标记法。在以mRNA制备cDNA时，同时掺入标记的脱氧核苷酸，制出cD－NA标记探针。
从化学和生物学意义上理解，探针是一种分子，它带有供反应后检测的合适标记物，并仅与特异靶分子反应。抗原-抗体、外源凝集素-碳水化合物、亲和素-生物素、受体-配基（ligand）以及互补核酸间的杂交均属于探针-靶分子反应。蛋白质探针（如抗体）与特异靶分子是通过混合力（疏水、离子和氢键）的作用在少数特异位点上的结合，而核酸探针与互补链的反应则是根据杂交体的长短不同...
在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg 2+ 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3～5min；在末次循环后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各...
英国的研究者称，干细胞移植后进行定量的反转录多聚酶链反应（RT－PCR）有助于慢性髓细胞性的进一步治疗。 伦敦Hammersmith 医院的Eduardo Olaverria 及其同事解释说：“RT－PCR已经广泛地应用于异基因干细胞移植后微小残留病变的监测。然而，此类研究大多采用的是定性RT－PCR，解释得出的结果是相矛盾的。” Olaverria 等采用...
此法标记原理如下图所示： 标记的HRP部分催化底物化学发光反应：氨基苯二甲酰肼 氨基苯二甲酸 +N 2 +光→X-光片上感光10～20min显定影。 光亮子在酚、萘及胺类等增强剂促进下，而使光亮增强。 这种方法就是利用特殊的酶底物，氧化后把产生的能量转变为光能放出，称为化学发光。杂交后与探针结合的酶催化相应的发光剂，经增强剂将光能放大，在X光片上显示杂交信号...
在温和的条件下，TNBS将核酸的胞嘧啶转化为N-甲氧基-5，6-二氢嘧啶-6-磺酸盐衍生物，对胞嘧啶残基进行磺化修饰制成磺化半抗原探针。此法十分简便，也可用于蛋白质的标记。标记方法：取变性单链的DNA5μg，溶于0.02mol/L硼酸钠缓冲液（pH8.6）中，加入TNBS5μg溶解，在室温中反应1h。移入冰浴中，加入无水乙醇和70%乙醇各洗1次，晾干，用50...
文件:DNA replication zh.png DNA复制 DNA复制 是指 DNA 双链在细胞分裂 分裂间期 进行的以一个 亲代 DNA 分子 为模板合成 子代 DNA链的过程。复制的结果是一条双链变成两条一样的双链（如果复制过程正常的话），每条双链都与原来的双链一样（排除 突变 等不定因素）。 DNA复制是一种在所有的生物体内都会发生的 生物学 过程...
文件:DNA replication zh.png DNA复制 DNA复制 是指 DNA 双链在细胞分裂 分裂间期 进行的以一个 亲代 DNA 分子 为模板合成 子代 DNA链的过程。复制的结果是一条双链变成两条一样的双链（如果复制过程正常的话），每条双链都与原来的双链一样（排除 突变 等不定因素）。 DNA复制是一种在所有的生物体内都会发生的 生物学 过程...
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