自1969年以来,我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的寡核苷酸探针;从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是,这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。
原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外,又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
核酸 分子杂交 是 基因诊断 的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的 DNA 单链 能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照 碱基 互补的原则进行,它不仅能在DNA和DNA之间进行,也能在DNA和 RNA 之间进行。因此,当用一段已知 基因 的核酸序列作出 探针 ,与变性后的单链 基因组 DNA接触时,如果两者的碱基完全配...
...经过过滤、消毒; 4)注意根据测量对象的变换选用合适的滤片系统、放大器的类型等; 5)特别强度每次测量都需要对照组。 本节 着重介绍了流式细胞计的基本结构和工作原理、技术指标及使用操作中的基本问题。由于实际使用的仪器厂家、型号差别很大,不能一一介绍,可参照仪器使用说明书使用。至于流式细胞术在生物医学工程和免疫组织化学应用中的一些具体技术途径则在下节 详细介绍
...,制备方法为用冷冻果糖液注入小鼠腹腔,轻揉腹部数次,吸出后的液体中即含小鼠腹腔细胞,其中在巨噬细胞和其他细胞。亦有用小鼠的脾细胞、大鼠或豚鼠的腹腔细胞作为饲养细胞的。 在制备饲养细胞时,切忌针头刺破动物的消化器官,否则所获细胞会有严重污染。饲养细胞调至1×10 5 /ml,提前一天或当天置板孔中培养。 (三)细胞融合 细胞融合是杂交瘤技术的中心环节,基本步骤...
一、基本原理
一、基本原理
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(一)层析技术的原理 层析法是目前广泛应用的一种分离技术。本世纪初俄国植物学家M.Tswett发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素还含有其它色素。现在层析法已成为生物化学、分子生物学及其它学科领域有效的分离分析工具之一。 层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,它或者是固体物质或者是固定于固体...
...,制备方法为用冷冻果糖液注入小鼠腹腔,轻揉腹部数次,吸出后的液体中即含小鼠腹腔细胞,其中在巨噬细胞和其他细胞。亦有用小鼠的脾细胞、大鼠或豚鼠的腹腔细胞作为饲养细胞的。 在制备饲养细胞时,切忌针头刺破动物的消化器官,否则所获细胞会有严重污染。饲养细胞调至1×10 5 /ml,提前一天或当天置板孔中培养。 (三)细胞融合 细胞融合是杂交瘤技术的中心环节,基本步骤...
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