1.检查抗原法 这是最早的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应抗原结合,在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差(图3-2)。 图3-2 直接法 2.检查抗体法 将抗原标记上荧光素,即为荧光抗原,用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应,而将抗体定位检...
1.检查抗体法(夹心法)此法是先用特异性抗原与细胞或组织内抗体反应,再用此抗原的特异性荧光抗体与结合在细胞内抗体上的抗原相结合,抗原夹在细胞抗体与荧光抗体之间,故称夹心法。 2.检查抗体法用已知抗原细胞或组织标本的切片,加上待检血清,如果其中含有切片中某种抗原的抗体,抗体便沉淀结合在抗原上,再用间接荧光抗体(抗种属特异性IgG荧光抗体)与结合在抗原上的抗体反...
染色试验(MBD)是诊断 弓形虫病 的可靠和敏感的方法,其在早期感染即出现阳性,并能维持1年之久,但该试验需用活的弓形虫,一般的医学检验室不易进行。补体结合试验阳性反应出现在病程后期并转阴较快,与染色试验结合使用有参考价值,皆因操作繁琐而为间接血凝、荧光抗体和酶免疫吸附测定等法所取代。一些新的测抗体的方法在国内使用尚不普遍。本文主要介绍点免疫金渗滤法。
染色试验(MBD)是诊断 弓形虫病 的可靠和敏感的方法,其在早期感染即出现阳性,并能维持1年之久,但该试验需用活的弓形虫,一般的医学检验室不易进行。补体结合试验阳性反应出现在病程后期并转阴较快,与染色试验结合使用有参考价值,皆因操作繁琐而为间接血凝、荧光抗体和酶免疫吸附测定等法所取代。一些新的测抗体的方法在国内使用尚不普遍。本文主要介绍点免疫金渗滤法。
...n,除去盐结晶。 3.用50%缓冲(0.5mol/L碳酸盐缓冲液pH9.0~9.5)甘油封固、镜检 4.对照染色 ①正常免荧光血清染色,如上法处理切片,结果应为阴性。②染色抑制试验(一步法):将荧光抗体和未标记的抗体球蛋白或血清(相同)等量混合,如上法处理切片。结果应为阴性。为证明此种染色抑制不是由于荧光抗体被稀释所致,可用盐水代替未标记抗血清,染色结果应为...
...后,关闭电源,置凝胶板于10.0%三氯醋酸液固定15~20min,取出胶板,在黑色背景灯光下量取沉淀峰高度,如图18-3所示。 图18-3 免疫火箭琼脂糖电泳图 7.计算 (1)查标准曲线。 (2)按下式计算: 8.如果需要也可将凝胶板置0.9% NaCl液漂洗过夜更换蒸馏水漂洗,底板衬以硬薄膜,尔后置染色液染色,脱色后可见明显的沉淀峰,干燥,以便长期保存。
...说明书),用微量加样器每份标本加1孔。加样量10μl。置湿盒(水平位置)37℃扩散24h,测沉淀环直径,如图18-2所示。 图18-2 单向免疫扩散图(0.8%琼脂糖) 4. 标准曲线的制备(参考方法) (1)参考血清稀释法:取Apo含量标准参考血清用盐水稀释成梯度浓度。ApoAⅠ:20、40、60、80、100mg/dl,同上法操作加样,每一稀释浓度应在两...
光化学与免疫法 (一)光化学治疗(puva) 补骨脂 素或其衍生物加紫外线可作用于表皮内与受损细胞邻近尚未完破坏或正常的黑素细胞,刺激这些细胞的功能,使酪氨酸酶催化黑素的合成,促进黑素细胞的分裂和移动,致使白斑的色素逐渐恢复。白斑的色素再生还常常始于毛球部黑素细胞的增殖,随后沿毛囊转移到漏斗部,最后在邻近角朊细胞内离心性扩散。可用 补骨脂 素(psorale...
...碘;二是蛋白损伤、变性,成为聚合大分子或断键成小分子碎片。由于上述原因,使B/F明显降低,标准曲线斜率变小,以致不能使用,故需分离纯化,其方法是用SephadexG100长柱(40~80cm )过柱,洗脱后出现3个峰。第1个峰分子量大,是蛋白变性的聚合的大分子,尚保留部分抗原决定簇,免疫活性弱;第2个峰是纯抗原的蛋白峰,免疫活性好;第3个峰是游离 125 I...
...列,同时将四种脱氧三磷酸核苷(其中一种用放射性标记)利用该酶5’—3’聚合活性补人缺口,使缺口逐个平称并在平移过程中形成标记的新生核酸链。此法也适用于探针的非放射性标记。如 32 P标记DNA探针(缺口平移法):反应体积为25μl,内含0.3μgDNA片段,4μl 0.2μmol/L dNTP, 1.1×10 6 Bq [α- 32 P]dATP,1μl2万...
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