...)和 分子 标记(molecular marker)五种类型。 遗传标记的发展 自从19世纪中期，奥地利学者孟德尔首创了将形态学性状作为遗传标记的应用先例以来，遗传标记得到发展和丰富。形态学标记、细胞学标记、 生化 标记、免疫学标记等一直被广泛应用，然而这些标记都无法直接反映遗传物质的特征，仅是遗传物质的间接反映，且易受环境的影响，因此具有很大的局限性。DN...
...用于荧光 免疫 法中标记 抗原 或 抗体 ，亦可用于 微环境 ，如表面活性剂 胶束 、双分子膜、 蛋白质 活性点位等处微观特性的探测。通常要求 探针 的摩尔 吸光系数 大，荧光量子产率高；荧光发射波长处于长波且有较大的斯托克斯位移；用于免疫分析时，与抗原或抗体的结合不应影响它们的活性。 也可用于标记待定的 核苷酸 片断，用与特异性地、定量地检测 核酸 的量。
...地控制探针的长度并可提高标记分子的利用率。 RNA探针和cDNA探针具有DNA探针所不能比拟的高杂交效率，但RNA探针也存在易于降解和标记方法复杂等缺点。 （四）寡核苷酸探针 前述三种探针均是可克隆的，一般情况下，只要有克隆的探针，就不用寡核苷酸探针。在DNA序列未知而必须首先进行克隆以便绘制酶谱和测序时，也常应用克隆探针。克隆探针一般较寡核苷酸探针的特异性...
序列标志 位点 (Sequence Tagged Sites，STS) STS是对以特定对 引物 序进行PCR特异 扩增 的一类 分子 标记的统称。通过设计特定的引物，使其与 基因组 DNA序列中特定结合位点结合，从而可用来扩增基因组中特定区域，分析其 多态性 。利用特异PCR技术的最大优点是它产生信息非常可靠，而不像RFLP和RAPD那样存在某种模糊性
生物素- 补骨脂 素是另一种生物素光敏物质，在长波长紫外线照射下与嘧啶碱基发生光化学反应，加成到DNA中，去除小分子后，得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA，及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法：取DNA或片段0.5μg加50μlTE（pH8.0）缓冲液中，再加入5μlg生物素- 补骨脂 素，溶解后，置365nm紫外光下直接照射...
在大肠杆菌T 4 噬菌体多聚核苷酸激酶（T 4 PNK）的催化下，将γ- 32 P-ATP上的磷酸连接到寡核苷酸的5’末端上。要求标记的寡核苷酸5’端必须带羟基。反应式为： 此法适用于标记合成的寡核苷酸探针。如将底物改为Bio –11 –dUTP，也可以在3’端标记上一个生物素。 寡核苷酸 35 S的3’—末端标记法：将下列液体依次加入Eppendorf管中...
...和延伸起辅助作用。 DNA复制也可以在体外（即人工地）进行，从细胞中分离的DNA 聚合酶和 人造的DNA复制 引物 可以用来启动以已知序列的DNA分子为模板的复制， 聚合酶链式反应 （PCR）是一种常见的实验室技术，这种采用了循环方式的人工合成，在一个DNA池中 扩增 出特定的DNA片段。 DNA复制 此时，原本呈双螺旋结构的两条链已经打开，并且每一条单链都...
...和延伸起辅助作用。 DNA复制也可以在体外（即人工地）进行，从细胞中分离的DNA 聚合酶和 人造的DNA复制 引物 可以用来启动以已知序列的DNA分子为模板的复制， 聚合酶链式反应 （PCR）是一种常见的实验室技术，这种采用了循环方式的人工合成，在一个DNA池中 扩增 出特定的DNA片段。 DNA复制 此时，原本呈双螺旋结构的两条链已经打开，并且每一条单链都...
...和延伸起辅助作用。 DNA复制也可以在体外（即人工地）进行，从细胞中分离的DNA 聚合酶和 人造的DNA复制 引物 可以用来启动以已知序列的DNA分子为模板的复制， 聚合酶链式反应 （PCR）是一种常见的实验室技术，这种采用了循环方式的人工合成，在一个DNA池中 扩增 出特定的DNA片段。 DNA复制 此时，原本呈双螺旋结构的两条链已经打开，并且每一条单链都...
由于酶标抗体存在一些缺点，例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性；②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后，与组织成分结合，可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上，发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法（Enzyme Bridge Method）和过氧化物酶抗过氧化物酶法（PeroxidaseAntiperoxidase Method,...
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