...并已迅速推广应用。 PCR技术有许多重要用途,其中之一便是可用来标记高比活性DNA探针。PCR技术具有很高的特异性,可在1~2h之内在量合成探针DNA片段,如果在底物中加入[α-32P]dNTP或其它标记的dNTP,则探针DNA合成过程中可得到很好的标记,标记物的掺入率可高达70%~80%。因此,PCR标记技术特别适用于大规模检测和非放射性标记。该法的缺点是...
通过核酸标记技术可将细胞因子cDNA作为基因探钊检测细胞内细胞因子基因组DNA或mRNA。主要有以下几种方法: 1.应用同位素(或非同位素)标记的cDNA探针,检测经Northernblot后细胞因子mRNA水平或采用打点杂交法。 2.应用标记cDNA探钊与细胞或组织切片进行原位杂交,然后进行放射自显影。 3.细胞因子mRNA经反转录为cDNA,用特异性细胞...
...片段筛选第三个重组克隆,如此重复,得到一个相邻的片段,等于在染色体上移了一步,故称之为 染色体步移 (Chromosome Walking)染色体步移技术(genome walking)是一种重要的 分子 生物学 研究技术,使用这种技术可以有效获取与已知序列相邻的未知序列。染色体步移技术主要有以下几方面的应用: ①根据已知的 基因 或分子标记连续步移,获取人...
同位素 示踪术是用 放射性核素 的 射线 作用,研究 细胞 对某种物质的吸收、合成、转运和分泌等 代谢 过程。将放射性核素或其 标记物 注入动物体内或加入 细胞培养 的 培养基 内,细胞摄取该物质后,取被检组织制成切片或细胞 涂片 。可用 显微镜 放射自显影术 (microau toradiography)检测该 放射性物质 在细胞内的原位分布及其代谢转归,...
...或染色体。 其它辅助检查 孕妇行羊膜囊穿刺可发现羊水细胞染色体异常可以早期筛查Down综合征患儿及其他染色体发育不全。 染色体检查可用 荧光原位杂交 技术(fluorescentinsituhybridizationtechnique)检测患者羊水细胞或染色体,如Down综合征可发现21号染色体为三倍体。 治疗和预防 治疗 染色体异常治疗困难疗效不满意,导致...
...~50%是由 染色体异常 所致;在新生活婴中染色体异常的发生率是0.5~1%。染色体病患者通常缺乏生活自理能力,部分患者在幼年即夭折,所以,染色体病已成为 临床遗传学 的主要研究内容之一。 染色体病的确诊一般是靠 染色体组型 的检查,收集受检查的 白细胞 ,用 秋水仙素 处理,使之均处于中期阶段, 染色 制片,检查染色体有无畸变,数目如何。发现后,目前尚无有...
...~50%是由 染色体异常 所致;在新生活婴中染色体异常的发生率是0.5~1%。染色体病患者通常缺乏生活自理能力,部分患者在幼年即夭折,所以,染色体病已成为 临床遗传学 的主要研究内容之一。 染色体病的确诊一般是靠 染色体组型 的检查,收集受检查的 白细胞 ,用 秋水仙素 处理,使之均处于中期阶段, 染色 制片,检查染色体有无畸变,数目如何。发现后,目前尚无有...
多线染色体 (polytene chromosome)一种缆状的巨大 染色体 ,见于有些生物生命周期的某些阶段里的某些 细胞 中。由 核内有丝分裂 产生的多股 染色单体 平行排列而成。各染色单体上的 染色粒 (见 灯刷染色体 )并排排列,构成多线染色体的带,带与带之间则称间带。多线染色体的这种结构可用 光学显微镜 观察,也能在多线染色体上用原位 分子杂交 法...
染色体工程 (chromosome engineering) 按设计有计划削减、添加和代换同种或异种 染色体 的方法和技术。也称为染色体操作。染色体工程一词,虽然在20世纪70年代初才提出,但早在30年代,美国西尔斯(E.R.Sears)及其学生就已开始研究。它不仅在改良植物的遗传基础培育新品种上受到重视,而且也是 基因定位 ,和染色体转移等基础研究的有效手...
...射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高,信号强,所以最常用。放射性同位素标记探针虽然敏感度高,但却存在辐射危害和半衰期限制(32P半衰期为14.3天,35S半衰期为87.1天,125I半衰期为60天),3H的半衰期长达12.3年,但它所释放β射线的能量太低,只能用于组织原位杂交。由于同...
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