...CR反应的成份。 此外,切片过程中要注意防止污染,以免出现假阳性。 最近,Davis等(1993)对PCR产物进行单链构型多态性(SSCP)分析,可以提高PCR敏感性5倍以上。SSCP分析是应用单链DNA在非变性聚丙酰胺凝胶上电泳,根据序列的不同所产生的构型差异来分析PCr 产物。此分析能检测出小到一个碱基的差异,因而可被广泛地用于研究点突变和基因多态性。 ...
基因定位可从家系分析、细胞、染色体和分子水平进行研究,同时由于使用手段的不同派生出多种方法,不同方法又可联合使用,互为补充。现仅就几个主要方法加以说明。 1.体细胞杂交法 体细胞是生物体除生殖细胞外的所有细胞。将从身体分离的体细胞做组织培养进行遗传学研究的学科称为体细胞遗传学(somatic genetics)。体外培养细胞可人为控制或改变环境条件,并可建立...
...ignal)区等,可从基因组文库中分离完整的基因。拼接基因应用更为广泛,可通过选择不同的启动子来控制外源基因表达的组织特异性。进行基因剔除转基因动物研究时,首先要设计与待剔除基因的同源性的载体基因,包括正负选择标志基因,通过同源重组(同源取代或同源插入)而使目的基因失活,从而建立缺基因动物。在进行基因设计时,还应考虑转基因动物的遗传背景和设计相应的检测方法,...
...都可直接或间接用可见光及紫外光 分光光度法 进行定量测定。 2、 原子吸收分光光度法 原子吸收光光度法是基于元素所产生的原子蒸气中,待测元素的基态原子,对所发射的特征谱线的吸收作用进行定量分析的一种技术。具有灵敏度高、选择性好、操作简便、分析速度快等优点,对大部分元素,其灵敏度约为10 -8 ~10 -10 g/ml,是 微量元素 检测的一个十分有铲的方法之...
滴定分析是通过“滴定”来实现的一种分析方法。在滴定过程中,使用的已知准确的溶液称为标准溶液,被滴定的溶液叫做试样溶液。当标准溶液与被测组成的反应恰好完全时,即为反应的理论终点,称为化学计量点附近发生的、容易观察到的变化来确定。若反应本身无此种变化,就须借助指示剂。指示剂所指示的反应终点称为滴定终点。 滴定分析法是基于标准溶液与被测组分之间发生化学反应时,它们...
...ignal)区等,可从基因组文库中分离完整的基因。拼接基因应用更为广泛,可通过选择不同的启动子来控制外源基因表达的组织特异性。进行基因剔除转基因动物研究时,首先要设计与待剔除基因的同源性的载体基因,包括正负选择标志基因,通过同源重组(同源取代或同源插入)而使目的基因失活,从而建立缺基因动物。在进行基因设计时,还应考虑转基因动物的遗传背景和设计相应的检测方法,...
...学说与西医生理解剖之间严重不符,如“心藏神”与脑主思维的矛盾、“肾藏精”与解剖生理的不符,“脾主运化”没有生理依据,“痰迷心窍”缺乏病理解剖的支持等,于是便认为西医的解剖生理的事实对中医理论构成了威胁,甚至认为证伪了中医理论,提出了废除中医、废医存药的主张。其实,中医的藏象理论是通过功能观察和唯象模型方法推导而来的,不是通过实验分析和实体模型方法而得出的,它...
基因突变引起的单基因病往往表现在酶和蛋白质的质和量的改变或缺如。因此,酶和蛋白质的定性定量分析是诊断单基因病或分子代谢病的主要方法。根据分子代谢病的临床特点可以从三个层次检测和分析。 1.代谢产物的检测 酶缺陷导致一系列生化代谢紊乱,从而使代谢中间产物、底物、终产物旁路代谢产物发生变化。因此,检测某些代谢产物的质和量的改变。可间接反映酶的变化而作出诊断。例如...
(一)方向方法 滴定分析中的计算主要包括标准溶液浓度的计算和被测定物质含量的计算。标准溶液的浓度常用物质的量浓度表示。物质B的浓度即可用下式求得: cB=nB/Vb (7-1) 或 cBVB=mB/MB(7-2) 在上面式子中,mb 为物质B的质量(g);MB 为物质B的摩尔质量(g˙mol-1);VB为物质B溶液的体积(L);cB即为物质B的量浓度(mol...
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