...性成正比。 2.细胞增殖法CSF的依赖株很多,如GN-CSF的依赖细胞株是DA3.15,M-CSF依赖细胞株是M14,G-CSF依赖株是NES60.4。待测样品与相应细胞株共同培养后,用 3 H-TdR掺入法或MTT法测定,根据依赖株细胞的增殖情况,检测不同CSF的生物活性。 此外,也可用免疫学检测法和分子生物学检测法,其检测原理与检测其它细胞因子基本相同。
IL-2的检测方法主要有两大类,一类是细胞增殖法,另一类是免疫学检测法。 (一)细胞增殖法 IL-2可刺激某些淋巴细胞增殖,根据细胞增殖情况可反映IL-2的活性,结果以U/ml表示。目前所用的IL-2反应细胞主要有CTLL、CTB6、F12、CTLL-2等小鼠IL-2依赖细胞株以及ConA活化的小鼠淋巴母细胞和小鼠胸腺细胞。这类细胞的增殖情况均可通过显微镜下...
细胞免疫(CMⅠ)是由多种细胞相互作用的结果。免疫细胞间相互作用导致多种细胞因子的释放。因此细胞功能测定不仅涉及T细胞的数量和功能与包括各类因子活性测定,因此评价机体的细胞免疫功能不仅程序复杂,且很难标准化
1.血清免疫球蛋白的测 定 血清免疫球蛋白(Ig)的测定是检查体液免疫功能最常用的方法。由于目前还没有发现由IgD和IgE缺陷所致疾病,所以通常检测IgG、IgM、IgA,这三类Ig就可以代表血清Ig的水平(表20-2)。检测发现三类Ig水平均明显低下,就可考虑体液 免疫缺陷 。但在分析儿童Ig水平时,应注意Ig的水平随年龄而变化。体液免疫功能缺陷首先考虑患...
...分子较大,仅当靶细胞膜完全被破坏时才释放,故不能较早地反映效应的功能。 (三)荧光法 检测原则是用荧光素标记靶细胞,经与效应细胞共温后,离心法上清,用荧光计检测剩余的活靶细胞的荧光,缺点是活细胞释放的荧光常被效应细胞和培养液等所粹灭。另外,荧光分析法常遇细胞自然释放率高,荧光本底强,影响灵敏度。为克服上述障碍,用时间分辨荧光免疫分析,将靶细胞用镧系元素铕(E...
...多糖抗原,经一定诱导期后,用适当的方法测定受检者血清中相应抗体的效价,根据抗体的水平也可判断受检者体内B细胞的功能。实验室常用如下的体外试验检测B细胞功能。 二、B细胞早期活性指标的测定 B细胞经不同抗原激发即开始分化增殖,初期表现为体积增大,可用仪器加以检测。激活的B细胞表面MHCⅡ类抗原的表达增多,可用相应的单克隆抗体通过荧光免疫或ABC法检测。 三、溶...
(一)本周蛋白的检测 本周蛋白即尿中游离的免疫球蛋白轻链,其检测对轻链病的诊断是必不可少的项目,并对 多发性骨髓瘤 、原发性巨球蛋白病、 重链病 等疾病的诊断、鉴别和预后判断均有一定帮助。 本周蛋白在pH5.0的条件下,加热至50℃~60℃时出现沉淀,继续加热至90℃后又重新溶解。根据这种理化性质,又将其称为凝溶蛋白,故可根据这一特点,用化学方法进行检测。这...
判定免疫复合物为发病机制的证据有三:①病变局部有IC沉积;②CIC水平显着升高;③明确IC中的抗原性质。第三条证据有时很难查到,但至少要具备前两条,单独CIC的测定不足为凭。人体在健康状态下也存在少量的CIC(大约10~20μg/ml),其生理与病理的界限不易区分。另外,CIC检测的方法太多,其原理各不相同,用一种方法测定为阳性,另一种方法检测可能为阴性;但...
IL-1有两种分子形式,即IL-1α和IL-2β,它们的生物学活性基本相同,均可采用生物学检测方法进行检测,若要区分IL-1α和IL-2β需用免疫学检测法。 (一)细胞增殖法 1.淋巴细胞增殖法IL-1具有淋巴细胞活化因子的活性,可以协同促有丝分裂原刺激T细胞或胸腺细胞发生有丝分裂,同时IL-1可以刺激T细胞产生IL-2或其它T细胞生长因子,并使之表达相应的...
IgE和IgG4(以下只用IgE代表)是介导Ⅰ型变态反应的抗体,因此检测血清总IgE和特异性IgE对Ⅰ型变态反应的诊断和过敏原的确定很有价值。 一、总IgE的测定 (一)测定方法 正常情况下血清IgE仅在ng/ml水平,用常规测定IgG或IgM的凝胶扩散法检测不出IgE,必须用高度敏感的放射免疫测定法及酶联免疫测定法进行检测。 1.放射免疫吸附剂试验(rad...
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