RNA（Ribonucleic acid 的缩写, 译称 核糖核酸 ）是存在于 细胞 生物的遗传讯息中间载体，并参与 蛋白质 合成；还参与 基因 表达调控。RNA普遍存在于动物、植物、 微生物 及某些病毒和 噬菌体 内。对一部分 病毒 而言，RNA是其唯一的遗传讯息载体。 RNA是由核糖 核苷酸 经磷酸双酯键缩合而成长链状分子。RNA一般是单链线形分子;也有...
...插入冰浴中，加入寡核苷酸（3pmol）×μl，5×加尾缓冲液20μl，5.0mmol/l dUTP 4μl（终浓度200μmol/L），修饰的dNTP（生物素-dUTP；生物素-dATP；地高辛-dUTP）×μl（终浓度100μmol/L），加入至100μl，混匀后加入末端转移酶5u。37℃反应1h。 （2）探针纯化：乙醇沉淀法：加入50μg tRNA，15...
...酶A。 脂肪酸分解与合成都需要辅酶A参加，在脂肪酸合成时，ACP与其他脂肪酸合成所需要的酶形成一个或几个复合体。这个体系以ACP为中心，其长的磷酸泛酰巯基乙胺侧链，俨然是一摆臂，把一个酶3分子中脂酰基转运到下一个酶分子上。 5.13.2 生物素 自然界的生物素有α、β二种，二者生理功能相同，在常温下稳定，但在高温和氧化剂作用下，可使其失去活性，它的化学结构如...
遗传信息 从 DNA 分子 抄录到 RNA 分子中的过程称为 转录 (transcription)。在 真核生物 中，最初转录生成的RNA称为不均一核RNA(heterogeneous nuclearRNA,hnRNA)，然而在 细胞浆 中起作用，作为 蛋白质 的 氨基酸 序列合成模板的是mRNA(messengerRNA)。hnRNA是mRNA的未成熟 前...
在温和的条件下，TNBS将核酸的胞嘧啶转化为N-甲氧基-5，6-二氢嘧啶-6-磺酸盐衍生物，对胞嘧啶残基进行磺化修饰制成磺化半抗原探针。此法十分简便，也可用于蛋白质的标记。标记方法：取变性单链的DNA5μg，溶于0.02mol/L硼酸钠缓冲液（pH8.6）中，加入TNBS5μg溶解，在室温中反应1h。移入冰浴中，加入无水乙醇和70%乙醇各洗1次，晾干，用50...
...插入冰浴中，加入寡核苷酸（3pmol）×μl，5×加尾缓冲液20μl，5.0mmol/l dUTP 4μl（终浓度200μmol/L），修饰的dNTP（生物素-dUTP；生物素-dATP；地高辛-dUTP）×μl（终浓度100μmol/L），加入至100μl，混匀后加入末端转移酶5u。37℃反应1h。 （2）探针纯化：乙醇沉淀法：加入50μg tRNA，15...
基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类，根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针，RNA探针，cDNA探针，cRNA探针及寡核苷酸探针等几类，DNA探针还有单链和双链之分。下面分别介绍这几种探针。
...性疾病的基因缺陷和一些 传染病 病原体的方法。其基本过程是：制备DNA探针，标记探针，检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来标记探针DNA。近年来，非同位素标记方法发展很快，已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法，是较为成功的一种非同位素标记方法。其原理是：用化学方法把类固醇类半抗原地高辛...
...T7启动子，在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可进行RNA转录。如果在多克隆位点接头中插入了外源DNA片段，则可以以DNA两条链中的一条为模板转录生成RNA。这种体外转录反应效率很高，在1小时内可合成近10μg的RNA产物。只要在底物中加入适量的放射性或生物素标记的dUTP，则所合成的RNA可得高效标记。该方法能有效地控制探针的长度并可提高标记分子...
应用探针DNA上的一个片段作为DNA引物，以环化探针DNA的重组质粒DNA为模板，在DNA聚合酶的作用下，通过变性，退火和延伸过程，使探针DNA得到标记。反应在0.5ml离心管内进行，总体积为25μl，内含50mmol/l Tris—HCl pH7.5, 10mmol/L MgCl 2 、BSa 5mmol/L、80ng引物DNA和0.1μg连接的DNA或0...
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