本法应用直接法或间接法的原理和步骤,可对活细胞在试管内进行染色,常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究,阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。
...原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。 (4)从组织中难于提纯抗原性物质,所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以致容易混淆。 (5)抗体分子上标记的荧光素分子太多,这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子,可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。 (6)荧光素不纯,标本固定不当等。
染色线 chromonema 亦称为螺旋丝、核丝。是用光学 显微镜 在分裂 中期染色体 、 染色单体 和间期核内所见到的最细的丝状构造。根据 电子显微镜 观察,一般认为它是由基本的 染色体 原纤维 经多次折叠而构成的
银染色 silver impregnation 亦称镀银。是一种 染色 方法,即先将 组织切片 用 硝酸银 或氧化银 浸渍 ,使银的氯化物、 磷酸盐 、 尿酸盐 等沉淀,水洗后,通过福尔马林、照相显影剂( 氢醌 )或日光的作用,使银还原,由于析出的金属银的作用而得到黑色的染色相。用这种方法,银盐的还原是通过从 细胞 外加入的 还原剂 或日光来进行的,而来源于...
消除荧光抗体非特异性染色的方法应根据产生的原因采取适当的方法,常用的方法有以下几种:
...用某些无毒或 毒性 很小的染料来显示细胞内某些天然结构,而不影响 细胞 的 生命活动 或产生任何 物理 、化学变化以致引起细胞的死亡。 活体染色 分体内活染和体外活染两种。体内活染是将染料直接注射到活的动物体内或加到活的植物 培养液 中进行 染色 的方法 ,体外活染是对离体的动、植物活组织或细胞进行的活体染色方式,又称为超体染色。 某些染料能进入活细胞,称为...
根据发明人命名的。 Franna Nissl (1860-1919) 1892年创立了Nissl 染色 法,以发现Nissl小体和Nissl变性而闻名。常用的碱性染料有Cresyl violet ( 焦油 紫, 甲酚 紫,克紫);thionine (硫荲);tolridine blue ( 甲苯胺蓝 )等
...:100)室温30min。 (5)DAB·4HCl/H 2 O 2 (0.05%/0.01%),室温1.5min。上述每一步骤后应用PBS洗涤(5min×3次)。 (6)在解剖显微镜下检出免疫反应阳性部位,修整组织,用0.1mol/L磷酸缓冲液稀释的1%锇酸(pH7.4)后固定30min~1h。 (7)按常规电镜样品制备, 脱水 、包埋、超薄切片、染色观察。
(一)背景染色产生的原因和防止方法 (1)第一抗体或金标抗体稀释度不合适,一般容易犯抗体使用过浓的毛病,认为抗体越浓越好,结果适得其反。应该先作方阵滴定,优选最佳稀释倍数(见第一章 ),即可避免非特异性染色,又可节 省抗体。 (2)使用正常箅清封闭和在抗体稀释液中加入 牛血 清白蛋白,可以减少非特异吸附,降低背景染色。 (3)显色的器皿必须彻底清洗,化学试剂...
1.国内应用的外周血培养染色体技术 (1)原理:外周血染色体制备是目前应用最广泛的细胞遗传学诊断技术,亦是基本的实验技术,由于取材容易,培养过程比较简单,短期内可以得到结果,所以其实用价值很高。 血液中含有红、白两类细胞,它们均是处于未分裂的间期细胞。红细胞没有核,无分裂能力;白细胞类虽有细胞核存在,但是外周血中处于休止期。植物血球凝集素(简称PHA)能促使...
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