为了得到更明确的染色结果，在用IGS方法定位细胞抗原时可采用搭桥法，使IGS得到放大，这里介绍一种用抗A蛋白抗体作桥的PAG放大法。下面以5-羟色胺定位为例说明这一新方法。 （1）石蜡切片→脱蜡至水。 （2）1%胰蛋白酶消化10min或3mon/L尿素消化30min。 （3）0.05mol/l pH7.4 TBS振洗5＇×2。 （4）1%EA封闭组织10mi...
第一种前列腺特异性抗原（PSA）检验是Elecsys总PSA免疫测定法。它将与直肠指检联合应用，在50岁以上的中进行 前列腺癌 检查。罗氏公司指出该测定法还可用于监测前列腺癌患者治疗的进展情况。 第二种测定法为Elecsys游离PSA免疫测定法，这是对第一种方法的补充，用于测定患者游离PSA与总PSA的比例。这两种方法都采用了罗氏公司的免疫测定系统。 罗氏公...
... 3 H标记探针4～8周， 35 S标记探针1～4周， 32 P标记探针7～10天。 （27）D 196 显影液，20℃显影5～10min。 （28）自来水冲洗数秒。 （29）F 5 坚膜定影液10min。 （30）自来水冲洗15min。 （31）切片温箱烤干，脱水，透明，封片。 结果：蛋白或多肽免疫反应阳性细胞为棕色胞质，而其相应mRNA为黑色银颗粒聚集。
...因的内含子（不转录基因）序列不同，和外显子（转录并翻译成蛋白质）序列差别均在酶切后的细胞总DNA中。 RFLP组织配型检测主要包括4个步聚（印迹）：①提取细胞总DNA，用限制性内切酶消化；②凝胶电泳；③将凝胶中分离好的DNA片段转移至尼龙膜上；④经变性处理后用同位素标记的探针进行分子杂交。经放射自显影，得到显影带（bands）。即可得知分子量大小不同的DNA...
1．原理这个方法用酰化剂3--（4-羟苯基）丙酸—N 琥珀 酰胺酯（Bolton—Hunter试剂）做连接试剂，将 125 I标记在羟苯基的2，5位置上，再将 琥珀 酰胺酯水解，通过一个酰氨键将3--（4—羟基—5— 125 I—苯基）接在蛋白或多肽的末端氨基上。 2．方法 125 I—Bolton—Hunter试剂可用氯胺T法自行制备，出已有该试剂的苯溶液...
除游离荧光素可用2×46cm柱层析法，详细方法参阅第二章 。加入荧光抗体15～18ml（按床体积的5%～10%加样），使其缓慢渗入柱内，待即将全部入柱时，加入PBS少许，关闭下口，停留30～40min ，使游离荧光充分进入细筛孔中，然后再接通洗脱瓶开始滴入洗脱液。加入洗脱液一定量后，荧光抗体即向下移行，逐渐与存留于上端的游离荧光素之间拉开明显的界线，随着大量...
在电镜水平应用较为广泛，因该法具有特异性中、灵敏度高、方法简便和背景染色淡等优点。蛋白A的免疫特异性在第五章 已作了介绍，PAg复合物制备方法简便，作为第二抗体，无种属特异性，可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用，蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性，又能保持高度的稳定性...
...l (pH7.5)150μl,2.5倍体积的95%乙醇，置液氮中15min或-20℃过夜。15000r/min，离心10min，真空干燥后，溶于适量三蒸水中，即为纯化的探针，-20℃备用。 使用闭环或线性双链质粒DNA，或分离的双链DNA片段均可进行此法标记，全质粒标记敏感性较高，因为标记物可同时掺入载体DNA。 此法也可用于放射性同位素和地辛标记DNA法。
光敏DNP由一连接臂组成，一端是2，4-二硝基苯，另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同，检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法：（1）DNA不心变性，必须溶于水中，取2～10μg10μl，加入二甲亚砜25μl，每微克DNA加入光敏DNp 2μg（在避光条件下），混匀。（2）置入冰浴中，在特制灯10cm下照...
...功地分离出幽门螺杆菌（Hp）后，已有越来越多的实验结果表明Hp与慢性胃和 溃疡 病有密切关系，可能是这些疾病的致病因素之一。目前诊断Hp的方法主要有组织培养法、尿素酶试验和各种染色法。鉴于这些方法繁琐、费时、须胃镜取材才能完成等，寻找一种敏感性高、特异性好、快速且简便的诊断Hp的方法，是目前急需研究和解决的问题。本文报道建立一种新的免疫酶技术—“双特异抗体”...
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