噬菌体是能感染细菌、放线菌、真菌、螺旋体的病毒。噬菌体分布广泛，凡是有细菌存在的场所，就可能有相应噬菌体的存在。噬菌体有严格的宿主特异性，只寄居于易感宿主菌体内。 在电镜下噬菌体有三种外形， 蝌蚪 形、微球形和线形。大多数噬菌体呈蜊蚪形，由头部和尾部两部分组成（图4-1）。但也有无尾的噬菌体。较大的噬菌体头部的形状常为六棱柱体，头部含有核酸，外围绕一层蛋白质...
1978年Collins和Hohn构建一种新型的大肠杆菌克隆载体，命名为cosmid（柯斯质粒）。它是用正常的质粒同噬菌体λ的cos位点构成。例如，柯斯质粒pHC79系由质粒pBR322和噬菌体λ的cos位点的一段DNA构成（图23-5），全长43.kb。在包装时，cos位点打开而产生噬菌体λ的粘性末端。由于pHC79有pBR322DNA，所以也就有氨苄青霉...
...大学西京医院皮肤科刘玲硕士等在完成的一项国家自然科学基金资助课题中，采用细胞内PCR扩增抗体基因的方法，成功构建一库容量为3×106白癜风的噬菌体抗体库。该抗体库的建立，为进一步研究自身抗体在白癜风发生发展过程中的作用及其治疗提供了崭新的思路。 据介绍，白癜风是一种常见的皮肤色素脱失性疾病。近年来有研究表明，白癜风与自身免疫密切相关，其患者体内存在抗黑素细胞...
...M9基本培养基平板上的划线培养，于37℃温育24～36h。 （2）批量制备冻存的感受态细胞的方法，同大肠杆菌感受态细胞的制备。 2.用M13噬菌体转染感受态细胞 （1）用2×YT或SOB培养液于37℃持续地振摇，将用于铺平板的细胞（JM101或TG1等）培养过夜。 （2）从-70℃以下冰箱中取出一份冻存的JM101或TGI感受态细菌，于室温慢慢融化，立即放在...
质粒 (plasmid)， 染色体 外能进行自主复制的 遗传 单位。包括 共生生物 、 真核生物 的 细胞器 和 细菌 细胞 中染色体以外的单纯的 脱氧核糖核酸 ( DNA ) 分子 。这个名词是 J.莱德伯格在1952年提出的，不过现在习惯上已用来专指细菌、 酵母菌 和 放线菌 等 生物 中染色体以外的单纯的 DNA分子。某些既能独立地存在于 细胞质 中又...
噬菌体是寄生于细菌的病毒，有宿主细胞的特异性，即某种菌的噬菌体仅能在该种菌内复制。在敏感菌中增殖并裂解细菌的噬菌体称为毒性噬菌体。另有一类称为温和噬菌体。这类噬菌体感染细菌后，有两种后果，即或裂解细菌或形成溶原状态（Lysogeny）。温和噬菌体裂解细菌的过程与毒性噬菌体相同，而形成溶原状态则为噬菌体的基因组整合于细菌的染色体上，并随细菌的繁殖传至子代。带有...
图16－9 DNA聚合酶的作用 1957年，Arthur kornberg首次在大肠杆菌中发现DNA聚合酶Ⅰ，(DNa polymerase Ⅰ,简写DNA polⅠ)后来又相继发现了DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ。(DNa polymerase Ⅱ，Ⅲ，简写DNA polⅡ,DNA polⅢ)实验证明大肠杆菌中DNA复制的主要过程靠DNa polⅢ起作用，...
（一）DNA的酶切与连接 （1）酶切反应 同质粒DNA的鉴定，只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切，则成比例增加。 （2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。 （3）15000rpm离心15min，弃上清。 （4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃上清，真空抽干。 （5）加入适量1×TE溶解。如此可得线性...
载体（vector）是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子，在进入受体后形成一个复制子，即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此，作为载体应该满足以下几方面的要求：①有某种限制酶的一个切点，最好是有许多种限制酶的切点，而且每种酶的切点只有一个；②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制，载体应...
噬菌体能展示各种分子的功能域或抗原、抗体的相应配体结构。只要有抗体，便可以从噬菌体展示肽库中筛选出与之相结合的特异性抗原表位。现在人们已经开始使用多克隆抗体来筛选噬菌体肽库来寻找某些疾病的诊断抗原。江苏省 血吸虫病 防治研究所科技部对噬菌体展示模拟抗原表位的血吸虫病诊断价值进行了研究。 方法：将目标噬菌体感染大肠杆菌er2537进行扩增，用聚乙二醇-8000...
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