Friou等(1957)首先用免疫荧光法检查出存在于SLE病 人血 清中的NAN,Alexander和Duthie(1958)证实了Friou等的结果。Friou等(1958)检查了28例SLE病人血清中有27例ANA阳性。一例阴性属临床长期不活动性病人。以后大量报告都指出用免疫荧光间接法检查ANA对于临床诊断SLE有重要价值,其阳性率在80%~100%之间
...74年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞125I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用125I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成纤维细胞)、组织或含有LDL-R的制剂一起孵育,使LDL-R与125I-LDL充分结合,形成受体-配体复合物,再除去未结合的125I-LDL,测定结合沉淀物中的放射性。同时检测细胞...
电子捕获检测器 (electron capture detector),简称ECD。 电子捕获检测器也是一种离子化检测器,它是一个有选择性的高灵敏度的检测器,它只对具有电负性的物质,如含卤素、硫、磷、氮的物质有信号,物质的电负性越强,也就是电子吸收系数越大,检测器的灵敏度越高,而对电中性(无电负性)的物质,如烷烃等则无信号。 概述 1. ECD在1961年问...
...最早介绍了夹心杂交类型,Ranki等又作了进一步的改进。夹心杂交法比直接滤膜杂交法有两个主要的优点:①样品不需要固定,对粗制样品能做出可靠的检测;②用夹心杂交法比直接滤膜杂交法特异性强,因为只有两个杂交物都杂交才能产生可检测的信号。 固相夹心杂交需要两个靠近而不互相重叠的探针,一个作固相吸附探针,另一个作标记检测探针。样品基因组内核酸只有使这两个探针紧密相连...
核糖核酸酶A [RNase A] 核糖核酸酶A是内切 核糖核酸酶 ,可特异地攻击RNA上 嘧啶 残基 的3'端,切割与相邻 核苷酸 形成的 磷酸二酯键 。反应终产物是嘧啶3' 磷酸 及末端带嘧啶3'磷酸的 寡核苷酸 。无 辅因子 及二价阳离子存在时,核糖核酸酶A的作用可被 胎盘 RNA酶抑制剂(B1ackburn et al.1977)或氧钒— 核糖核苷 复...
核酸分子的固相杂交是将待测核酸样品结合在某种固相支持物上,然后与溶液中的标记探针进行杂交。目前使用最多的固相支持物是硝酸纤维膜。这里重点介绍直接点样技术,转移技术及其它常用的杂交技术。 (一)斑点杂交的直接点样法 斑点杂交或叫打点杂交(dot-blot hybridization),其主要特点是事先不用限制内切酶消化或用凝胶电泳分离核酸样品,操作简便,灵敏度...
随着基因工程研究技术的迅猛发展,新的核酸分子杂交类型和方法在不断涌现和完善。核酸分子杂交可按作用环境大致分为固相杂交和液相杂交两种类型。固相杂交是将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。液相杂交所参加反应的两条核酸链都游离在溶液中。 由于固相杂交后,未杂交的游离片段可...
...单链,这一过程称为变性,一般通过加热或提高pH值来实现。使单链聚合双链的过程称为退火或复性。用分子杂交进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素或非同位素标记成为探针,再与另一种核酸单链进行分子杂交。 核酸杂交技术基本上是Hall等1961年的工作开始的,探针与靶序列在溶液中杂交,通过平衡密度梯度离心分离杂交体。该法很慢、费力且不精确,但它开拓了...
据美国科学家报道,预示 膀胱癌 癌前病变的生物标记物可在病理诊断前被检出。 美国俄克拉荷马州大学卫生科学中心的George P.Hemstreet博士将受试者随机分为联苯胺暴露组(1788例)和非暴露组(373例),然后检测受试者尿液标本中膀胱上皮细胞的DNA倍体型、 膀胱肿瘤 相关抗原p300以及球形肌动蛋白(G-actin)。 结果发现,30例被诊断为膀...
...但研究人员有信心认为,在进行患者临床试验之后,它的价值就会被得到证明。 德蒙福特大学研究生院主管麦考密克教授表示,比起早期胸部肿瘤x射线透视检测法来说,这种方式的造价更低。 精确度更高 这位教授还表示,尽管在目前来说,早期胸部肿瘤x射线透视检测法仍是 绝经 后的妇女检测是否患有乳腺癌的最佳办法。 但他说,使用胸罩型乳腺癌检测装置的好处是,这种新技术可适合所有...
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