...揭示发病的机制及本质、诊断、治疗疾病的媚力不可抗拒,人们正在努力改进技术以便符合临床要求。如PCR技术的出现,立即得到临床的响应。 一、诊断分子生物学技术应用范围 外源基因侵入致病,如病毒、细菌、支原体、衣原体、寄生虫等的传统检验、分类方法效率低,往往不能满足临床要求。而外源致病生物侵入体内发病时,拷贝数较高,样品取材、核酸提取相对容易,加之诊断分子生物学技...
核酸 存在于多种 细胞 ,如 病毒 、 细菌 、 寄生虫 、动植物细胞;多种 标本 中,如 血液 、组织、 唾液 、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种 DNA 、 RNA 的丰度差异,各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异,因此在实验前应对采用的方法有所了解和选择。总的说来核酸的分离与 纯化 是在溶解细胞的基础上,利用 苯酚 等有机溶剂...
...点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性,提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此,寡核苷酸探针的研究,对于提高核酸杂交技术的特异性和敏感性,扩大应用范围有重要意义。 常用的寡...
杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞作小 鼠骨 髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长(选择原理后见),小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力,形成同时具备抗体分...
...和科委颁布的一个级学科中,称为“生物化学与分子生物学”,但两者还是区别的。生物化学是从化学角度研究生命现象的科学,它着重研究生物体内各种生物分子的结构、转变与新陈代谢。传统生物化学的中心内容是 代谢 ,包括糖、 脂类 、 氨基酸 、 核苷酸 、以及 能量代谢 等与生理功能的联系。分子生物学则着重阐明生命的本质——主要研究生物大分子 核酸 与 蛋白质 的结构与...
...糖尿病 、 高血脂 症、甚至肿瘤中的一部分,均是当前研究的重点,近期内可望有突破。 2.致病病原体的检测 这些外源入侵的基因,一旦阐明其部分核酸序列,就可以设计引物或探针,用PCR、PT-PCR或杂交方法来检测,其范围包括细菌、病毒、原虫及寄生虫、霉菌、立克次体、衣原体和支原体等一切微生物,PCR诊断的特点是可以选择其基因中的保守区作通用检测,也可以选定差异...
...的 细胞核 内,是一类称为小核 核蛋白体 复合体 (snRNP)的组成成分,有U1,U2,U4,U5,U6snRNA等,均为 小分 子 核糖核酸 ,长约106?89个 核苷酸 ,其功能是在hnRNA成熟转变为mRNA的过程中,参与RNA的 剪接 ,并且在将mRNA从细胞核运到 细胞浆 的过程中起着十分重要的作用(表15-10)。 表15-10 snRNA的种...
分子 生物学 主要包含以下三部分研究内容: 1 核酸 的分子生物学 核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递信息,因此 分子遗传学 (moleculargenetics)是其主要组成部分。由于50年代以来的迅速发展。该领域已形成了比较完整的理论体系和研究技术,是目前分子生物学内容最丰富的一个领域。研究内容包括核/ 基因组 的结构...
...、41、62、64和376bp,但这些重复顺序几乎都共有一种“核心顺序”。“核心顺序”长10~15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针,同经限制性内切酶酶切的人体DNA作Southern印迹杂交,可以得长度不等的杂交带。杂交带的数目的分子量大小几乎不可能有两个人会完全相同的,因此把这种杂交带的图型称为“DNA指纹”(DNafinger-p...
按酶的来源的属、种名而定,取属名的第一个字母与种名的头两个字母组成的三个斜体字母作略语表示;如有株名,再加上一个字母,其后再按发现的先后写上罗马数字。例如:从流感嗜血杆菌d株(Haemophilus influenzae d)中先后分离到3种限制酶,则分别命名为HindⅠ、HindⅡ和HindⅢ。
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