胶体金双标记技术(常用为蛋白A—胶体金)_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

1.单面法 以不同直径的金粒分别标记两种不同的抗体,以间接法先染第一种抗体,洗净后再染第二抗体。 2.双面法 以不同直径的金粒标记的抗体于镍网的两面分另进行免疫染色。本法的优点是可防止两种金标记的抗体的相互干扰,又可防止第一次应用的一抗与其相应的抗原相结合,占据了空间,第二次应用的抗体没有适合的空间使之与相应的抗原相结合。 3.异种动物抗原—抗体染色法 如一...

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蓝色荧光素标记抗体方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

Kbaffan等(1986)首先创立了蓝色荧光素标记和染色技术,可进行双标记或多标记。 (1)取7-氨基-4-甲基香豆素(7-amino-4-methyl coumarin, AMC)260μg溶于二甲亚砜25μl中。 (2)将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液(0.5mol/L,pH8.5,内含50~100mg IgG)中,室温反应2h,过Sepha...

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眼科常用辨证方法_【中医宝典】

眼科的辨证方法和程序与内科大体相似,亦是在中医整体观念理论指导下,将四诊所收集的眼与全身的客观症情,以八纲、病因、脏腑、气血等辨证方法进行分析归纳,作出判断。至于眼科的独特之处,在于眼病的发生,局部症状比较突出,故《 审视瑶函 ·识病辨症详明金玉赋》:“论目之病,各有其症,识症之法,不可不详。故曰:证候不明,愚人迷路,经络不明,盲子夜行,可不慎乎。凡观人目,...

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PE-标记蛋白A方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...l/L二硫苏糖醇(DTT)pH7.4缓冲液,22℃,25min,同上过Sephadex G-50,收集蛋白A峰。 (3)取0.77mg/ml的PE和0.27mg/ml蛋白A等量混合,22℃反应6h,混合物4℃保存备用。 以上两种PE标记制品,可最后溶于0.01mol/l pH7.4PB(含有0.1mol/l DETA、1mol/L碘乙酰胺、1%BSA 和0....

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几种简便常用的微循环障碍动物模型复制方法_《实验动物科学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)高分子右旋糖酐(HMWD)法 选择2~3公斤的健康家兔,雌雄不限。复制模型当天禁食、禁水。实验前观察眼球结膜微循环,采用微血管光滑、血流正常的动物,于清醒状态下复制模型。HMWD是一种多聚化合物,它能在红细胞间形成较多的稳定的间桥,表面桥力大于原来的电荷排斥力,从而造成红细胞聚集;加之其本身又是一种高粘度物质,还可增加血粘度。将平均分子量为20~40万...

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酶活性测定的常用技术和方法_《临床生物化学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

从广义上说,任何一种可以测定反应物变化速度的分析技术,不论是经典的比色法、容量法,还是现代的仪器分析技术都可用来测定酶活性浓度,但从历史和发展来看,主要还是使用分光亮度法和量气法。

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胶体金标记物的制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带正电荷,胶体金带负电荷,二者极易静电结合形成大的聚合物。如果pH高于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,与金颗粒的负电荷相互排斥而不能互相结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用 牛血 清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或 明胶 作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400)层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于...

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生物素随机引物标记探针方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...至48μl,加DNA聚合酶(SABC)8u,混匀,37 ℃ ,2h,加0.5mol/l EDTA(Ph8.0)2μl,终止反应。 在随机引物标记体系中,加入不同梯度浓度比值的Bio-11-dUTP/dTTP(%),发现二者比值明显影响探针标记率和显色灵敏度。Bio-11-Dutp/dTTP(%)比值为35%时,其标记率最高,显色灵敏度达0.2pg,杂交灵敏度...

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受体与标记配体的结合分析_《动脉粥样硬化》在线阅读_【中医宝典】

为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞 125 I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用 125 I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成纤维细胞)、组织或含有LDL-R的制剂一起孵育,使LDL-R与 125 I-LDL充分结合,形成受体-配体复合物,再除...

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常用统计图的绘制方法及注意事项_《医学统计学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)条图 又名长条图 ,以条的长度表示事物的数量。可用以表示绝对数、也可用以表示相对数或平均数,常用的有单式条图、复式条图和分段条图。 1.单式条图:如图2.1,为某医院十年来六种疾病住院患者死亡人数。其资料见表2.6。 2.复式条图:用以比较两种或两种以上有关事物的数量。如图2.2表示某师各团菌痢和肠炎的发病人数,其资料见表2.7。 3.分段条图:用以比...

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