在寄生虫学中应用免疫细胞化学方法,对于人体大多数寄生虫都较其他血清学方法敏感。图象鲜明,易于观察。在诊断方面,免疫荧光间接法最常用于检查宿主的抗体。抗原制备容易,只需要作成切片、涂片或压印片标本,不需提纯可溶性抗原;有些可溶性抗原固定于醋酸纤维滤纸上,反应后以荧光计读数,可以定量。 但是,对于血中缺乏抗体的寄生虫如 皮肤利什曼病 ,则难以诊断。还有些寄生虫(...
寡核苷酸探针的优点在于它能根据需要人工用DNA合成仪合成,其长度及分子大小比较一致,可以控制。其长度一般较克隆的DNA片段短。目前,寡核苷酸探针已能成功的为放射性同位素、荧光素、生物素和地高辛所标记,并成功地运用于培养细胞、组织切片和染色体铺片等的原位杂交中。虽然有些科技工作者认为其敏感度不如来自质粒扩增的cRNA或DNA探针,但由于探针制备简便再加之于近年...
(一)质粒DNA的提取及鉴定 1. (1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中,接入一单菌落,于37℃剧烈振荡培养过夜。 (2)将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中,用台式离心机于4℃以12000g离心5min,将剩余的培养物贮存于4℃。 (3)吸尽培养液,使细菌沉淀尽可能干燥。 2.碱裂解法小量抽提质粒 (1)将细菌沉淀...
用HEP-2细胞或大 鼠肝 细胞作抗原,作间接免疫荧光染色。结果可见细胞核核仁呈现明亮的黄绿色荧光。抗核仁抗体在 硬皮病 、 皮肌炎 、系统性 硬化 症等中最多见。
免疫荧光细胞化学应用于 梅毒 血清学诊断有很多文献报道。70年代应用PAP法又将敏感性提高了许多倍,此法已作为梅毒诊断的常规方法。用间接免疫荧光法可PAP法,取已知梅毒螺旋体作抗原,检查病 人血 清中的特异性抗体。 (一)抗原制备 以标准株(如Nicol株)梅毒螺旋体感染家兔睾丸,约1周后待睾丸产生明显炎症,剖腹将睾丸摘除,仔细清除精索、附睾和包膜,然后以灭...
免疫细胞化学在细菌学中主要用于菌种鉴定和抗原结构的研究。细胞都各自有其特异性抗原,应用特异性抗体的荧光素或酶标记物,可以鉴定任何一种细菌。已经成功地用于鉴定几乎所有致病菌的纯培养。尤其是应用免疫荧光技术具有较其他血清学方法简便、快速和敏感等优点,并能直接进行细菌形态观察。可用于鉴定的材料也比较多样,如培养物、感染组织、病人分泌排泄物,外环境中采集材料(土壤、...
...din – Biotin - Enzyme com-plex, 即亲合素- 生物素-酶复合物。 以上反应AP亦可用HRP代替。 表18-3曱核酸探针的标记分子 标记物性质 标记分子 标记方法 杂交体的检测法 放射性分子 [α-32P]dNTP NT、PCR、RPI 放射自显影或计数 [γ-32P]dNTP TL 放射自显影或计数 125I 碘化 放射自显影或...
...是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高其分辨率,即向电镜水平发展。Jacob(1971)首先用 3 H标记的核酸RNA探针与DNA杂交并在电镜水平显示获得成功,继后不少科技工作者在这方面做了大量的工作(Manning et al 1975,Steinert et al1976,Hutchison et al 1982)。但所应...
...生 病毒性肝炎 病人血清中SMA为IgM,而慢性活动性肝炎病人血清中SMA在发病初期(1~4期)为IgM,而后为IgG。Anderson利用纯化肌浆蛋白为抗原与肝炎病人血清中分离的IgM和IgM类SMA进行吸收试验,证明了SMA的特异性。Holborrow Gamel和Renbe先后观察了SMA与 鼠肝 细胞,肾小球及人的甲状腺上皮细胞和血小板等组织为抗原的...
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