...-AG(20μg/ml),在HAT培养液中不生长。 3.小鼠P3-X63-Ag8.653(1979年Kearney)。是P3-X63-Ag8的亚克隆,不可逆地丧失表达免疫球蛋白rl重链和K轻链的能力,其生长特性、融合率及所产生的杂交瘤细胞系的稳定性等方面均可与PS-X63-Ag8或P3-NS1/1-Ag4-1相比拟。 4.小鼠P3-X63-Ag8-U1(19...
由于免疫细胞化学所应用的各种标记物如铁蛋白、胶体金和荧光素等都能无例外地与配体(即与受体呈特异结合的物质)相结合,因此可应用于细胞表面(包括神经细胞和神经胶质细胞)表面受体的定位。Philips和Bennet(1987)应用抗肌球蛋白和荧光素标记的α- 眼镜蛇 毒素成功地显示了乙酰胆碱受体(Acetycholine receptor clusters)在鸟肌...
利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性,提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能有一种适用于所有抗原的固定剂,而是根据不同的抗原性质区别对待...
...angley就建议将胃肠道这个局部的神经系统命名为肠道神经系统(enteric nervous sys-tem),并建议作为植物性神经系统中的,与交感和副交感神经系统并列的第三个部分。随着近代组织学技术的发展,大量实验资料证明,肠道神经系统的独特性,组织连接的复杂性和神经细胞类型的多样性,确实不同于其它两部分植物神经系统。 图13-1 肠道神经丛分布模式图 ...
... 2 期和M期为4C,S期则在2C到4C之间。所以在FCM的DNA直方图上形成的谱线则为峰分布,而且G 1 峰的道数恰好是G 2 和M峰道数的一半(图10-7)。研究表明:对于正常细胞群,各周期时相的细胞数的比例是同一的;对于恶性病变的细胞群则是非均一的(图10-8)。 图10-7 细胞周期的DNA直方图 图10-8 细胞周期中的细胞数目与肿瘤的关系 临床肿...
对制备的McAb进行系统的鉴定是十分必要的,应做下述几个方面的鉴定: 1.抗体特异性的鉴定 除用免疫原(抗原)进行抗体的检测外,还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验,方法可用ELISA、IFA法。例如:①制备抗 黑色素瘤 细胞的McAb,除用黑色素瘤细胞反应外,还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应,以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克...
样品的正确收集与处理,是蛋白质及多肽激素放射免疫分析取得成功的前提。不同的样品与测定项目,其前处理有不同的要求。下面以神经肽测定为例,介绍样品的前处理方法。
...进一步证实。 2.Southern印迹杂交 Southern印迹杂交是经典的基因分析技术,已被广泛地用于基因突变,扩增、重排和丢失等许多方面的研究。石蜡包埋组织的Southern印迹杂交分析有以下几个方面值得注意: (1)当所分析的酶切片段长为300~500bp时,包埋组织DNA杂交信号强度只有相同量标准DNA的10%~85%。信号强度与原始DNA大小呈正相...
...NA产量为26.6μg,高于新鲜标本(19.4μg/mm 3 )。经限制性内切酶消化后,乙醇固定组织DNA均显示由于重复DNA序列存在所产生的特征性卫星带,说明DNA被完成消化。Southern印迹杂交结果与冰冻组织一致。 Sato 等(1990)用AMex方法处理组织,既可保存许多抗原成分,亦可使大分子量DNA完好无损。其基本方法为:将组织放至4℃丙酮浸透...
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