生物素标记的核苷酸是最广泛使用的一种,如生物素-11-dUTP,可用缺口平移或末端加尾标记法。实验发现生物素可共价连接在嘧啶环的5位上,合成TTP或UTP的类似物。在离体条件下,这种生物素化dUTP可作为大肠杆菌多聚酶I(DNA酶I)的底物掺入带有缺口的DNA或RNA,得到生物素标记的核酸探针。这种标记方法称为缺口平移法。用标记在DNA上的生物素与链霉亲合素...
为了探讨不同器官保存液保存胰腺对胰岛分离、纯化及功能的影响,以成人胰腺为研究对象,分别以高渗 枸橼 酸钾溶液(HC-A液)与威斯康新大学器官保存液(UW液)灌洗、保存胰腺,进行胰岛分离及纯化,比较两组分离、纯化后收获的胰岛数及胰岛当量数(IEQ),并在体外评价其功能。发现两组在胰腺重量、热缺血时间、冷缺血时间没有明显差异的情况下,胰腺分离、纯化后所获得的胰岛...
用 荧光素 、 同位素 或 酶标记 抗体 或 抗原 ,用于抗原或抗体检测是目前广泛应用的敏感、可靠的方法。上述三种常用的 标记物 与抗原或抗体 化学 连接之后不改变后者的 免疫 特性。本方法可用于定性、定量或定位检测。 1. 免疫荧光技术 免疫荧光技术(immunofluorescencetechni)是用化学方法使荧光素标记的抗体(或抗原)与组织或 细胞 ...
...物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程序复杂,产量低,成本高。 化学修饰法是将不同标记物用化学方法连接到DNA分子上,方法简单,成本低,适用于大量制备(>50μg)如光敏生物素标记核酸方法,不需昂贵的酶,只在光照10~20min,生物素就结合在DNA或RNA分子上。 非放射性标记核酸探针方法很多,现介绍常用的几种...
分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高,信号强,所以最常用。...
...林省通榆产枸杞(系指吉林省通榆县引种的茄科植物宁夏枸Lycium barbarum L.的干燥成熟果实。以下简称吉林枸杞,经50度白酒提取后的制药废渣经水提、醇析后得到的棕色无定形粉末。各单糖标准品均为上海试剂二厂的生化试剂,其他化学试剂均为分析纯。721型分光光度计,岛津-GC7A型气相色谱仪。 2 方法与结果 2.1 吉林枸杞制药废渣中粗多糖的提取纯化 ...
从广义上说,任何一种可以测定反应物变化速度的分析技术,不论是经典的比色法、容量法,还是现代的仪器分析技术都可用来测定酶活性浓度,但从历史和发展来看,主要还是使用分光亮度法和量气法。
...=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带正电荷,胶体金带负电荷,二者极易静电结合形成大的聚合物。如果pH高于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,与金颗粒的负电荷相互排斥而不能互相结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用 牛血 清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或 明胶 作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400)层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于...
...性填充;原发性肝癌血供较丰富,可见一定程度的填充,其放射性与周围正常肝相仿; 肝海绵状血管瘤 血供极丰富,填充程度远超过正常肝组织而显示明显的放射性浓集区,故本法对海绵状 血管瘤 的诊断符合率明显高于XCT和超声检查,是诊断本病的首选方法。 3.肝胆显像:目前国内常用的肝胆显像剂( 99m Tc-EHIDA)能很快被肝细胞摄取,并迅速经胆道系统排至肠道。于静...
...六次,达到纯化。纯化后铁蛋白在半饱和的硫酸溶液内可保存1~2年。用时以蒸馏水透析除盐后即可应用,应用前可以用负染色法在电镜下观察,了解铁蛋白的完整性和纯度。 商品制备的铁蛋白是用2%硫酸铵溶液稀释的1%~2%溶液(pH5.85)。为了在应用中得到满意的结果,应用前必须将商品制备的铁蛋白进一步纯化。纯化的方法是用0.1n NaOH或0.1n HCl调整pH值至...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。