...genefamilies)(表5-1)。每个家族的成员具有独特的结构特征,相互之间在进化上可能有一定关系。如IL-1、M-CSF、G-CSF和IL-6受体的细胞外段均含有一个Ig样的功能区,因此属于Ig基因超族(immunoglobulingenesuperfaamily)。而TNF受体家族的特点是在细胞外段含有4个富含半胱氨酸的区域;属于此家族的还有神经生...
...当浓度,加入培养板小孔中,置37℃,5%CO 2 温箱中培养16~24h,换液后,在各孔中加入不同稀释度的待检样品,再加适当浓度的放线菌素D和适量培养液,继续温育16~24h,弃培养液,经Hanks液洗涤后,每孔加入适当浓度的结晶紫染色液,37℃培养1h,使活细胞充分着色。然后各孔加1%SDS短时温育使染色细胞溶解,再以酶标测定仪测各孔A 570nm 值。每...
免疫原性是抗原最重要的性质,一种抗原能否成功地诱导宿主产生免疫应答取决于三方面的因素:抗原的性质、宿主的反应性和免疫方式。这里重点叙述抗原自身的因素。 (一)异物性 正常成熟机体的免疫系统能够区别宿主自身物质与非自身物质,对自身物质一般不产生免疫应答,只对非自身物质产生免疫应答。抗原通常是非自身的物质。对人,病原微生物及其部分产物、动物血清蛋 白及 异体组织...
(一)特异性 抗原抗体的结合实质上是抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之间的结合。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原与抗体的结合具有高度的特异性。这种特异性如同钥匙和锁的关系。例如 白喉 抗毒素只能与相应的外毒素结合,而不能与 破伤风 外毒素结合。但较大分子的蛋白质常含有多种抗原表位。如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原表位,或抗原、抗体间构型...
.../ml表示。目前所用的IL-2反应细胞主要有CTLL、CTB6、F12、CTLL-2等小鼠IL-2依赖细胞株以及ConA活化的小鼠淋巴母细胞和小鼠胸腺细胞。这类细胞的增殖情况均可通过显微镜下直接计数、 3 H-TdR掺入法以及MTT法加以测定。 1.依赖性细胞株增殖法IL-2依赖细胞株在IL-2存在时才能生长,而对PHA、ConA等促有丝分裂原及IL-2以外...
...多肽链:1条为α链,分子量55kD;1条为β链,分子量75kD;另1条为γ链,分子量64kD。α链的胞内区较短,不能向细胞内传递信号,而β链和γ链的胞内区较长,具有传递信号的能力。3种肽链单独与IL-2结合亲和力较低,只有同时表达才能产生高度亲和力。 (二)IL-2的生物活性 1.刺激T细胞生长各种刺激物活化的T细胞一般不能在体外培养中长期存活,加入IL-2...
免疫固定电泳(immunofixationelectrophoresis,IFE)是Alper和Johnson(1969)推荐的一项有实用价值的电泳加沉淀反应技术。可用于各种蛋白质的鉴定。该法原理类似免疫电泳,不同之处是将血清直接加于电泳后蛋白质区带表面,或将浸有抗血清的滤纸贴于其上,抗原与对应抗体直接发生沉淀反应,形成的复合物嵌于固相支持物中。将未结合的游...
...殖情况即可反映IL-3的活性。目前常用于细胞增殖法的IL-3反应细胞有骨髓干细胞、骨髓来源的IL-3依赖株及肥大细胞等。此外,也可取小鼠胫骨和股骨骨髓细胞加受检样品,制成琼脂平板,置5%CO 2 37℃温育1周后,计数集落形成数,凡细胞数等于或大于40~50个的细胞团块计为一个集落,根据形成集落数的多少判断IL-3的活性。 IL-3除刺激骨髓细胞增殖外,也能...
...得大量血清(一头成年马反复采血可获得10000ml以上的抗血清);但有时抗体需要是不多,选用家兔或豚鼠即可。③抗血清的要求:抗血清可分为R型和H型。H型抗血清用于沉淀反应较难掌握,因而极少应用。④抗原的选择:对蛋白质抗原,大部分动物皆适合常用的是 山羊 和家兔。但是,在某些动物体内有类似的物质或其它原因,对这些动物免疫原性极差,如IgE对绵羊、胰岛素对家兔、...
检测细胞因子的方法主要有生物学检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法。 一、生物学检测法 生物学检测又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。由于各种细胞因子具有不同的活性,例如IL-2促进淋巴细胞增殖,TNF杀伤肿瘤细胞,CSF刺激造血细胞集落形成,IFN保护细胞免受病毒攻击,因此选择某一细胞因子独特的生物活性,即可对其进行检测。生物活...
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