取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min（在通风橱中）。然后加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。 取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液，边加入边搅拌，在0～4℃中结合12～18...
作为示踪剂及分析试剂的标记化合物，应具有比一般非标记化合物更高的质量要求。标记化合物的质量指标包括：放射性核纯度、放射化学纯度、放射性比活度、生物活性和免疫活性以及标记位置和定量分布情况等。 1．放射性核纯度及其检查方法 （1）放射性核纯芳可用下式表示： 放射性核纯度（%）=所需放射性核素的活度/样品的总放射性活度×100 （2）放射性核纯度的检查方法：每一...
...的蛋白质（这时表面上活性可能还是良好的），再经标记反应时所受的损伤，活性就会显着降低，影响以后的放射分析结果。有了好的纯抗原，还要采用适当方法加以标记，尽量获取高比放射性、而又能保持良好的特异免疫化学活性的标记物。这些都是放射免疫分析能取得高特异性和高灵敏度的关键问题。 多肽激素与蛋白质多用碘标记，最常用的是 125 I。碘化反应的基本过程如下：通过氧化剂的...
...等）维生素、药物、IgE等。 3．酶联免疫分析法 酶联免疫分析法（enzyme immunoassay,EIA）是当前应用最广泛的免疫检测方法。本法将抗原抗体反应的特异性与酶对底物高效催化作用结合起来，根据酶作用底物后显色，以颜色变化判断试验结果，可经酶标测定仪作定量分析，敏感度可达ng水平。常用于标记的酶有 辣根 过氧化物酶(horseradish per...
... 上皮细胞 和粒细胞中的H2O2可使I氧化生成I2，进而使 蛋白质 碘化，这与 甲状腺素 的生成和消灭细菌有关。但是H2O2也可使 巯基 酶和蛋白质氧化 失活 ，还能氧化生物膜磷脂分子中的 多不饱和脂肪酸 ，损伤生物膜结构、影响生物膜的功能，此外H2O2还能破坏 核酸 和 粘多糖 。人体某些组织如肝、肾、 中性粒细胞 及 小肠 粘膜上皮细胞中的 过氧化物酶...
...浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果，BSA稳定的标记胶体金，放在4 ℃ 达2年半仍然保持良好性能，而用PEG稳定的标记胶体金放在4℃1年左右就有分层现象，而且染色效果显著下降。因此，我们认为最好还是用BSA作稳定剂。 （4）将标记好的胶体金装入透析袋中，两头扎紧，放入蔗糖或硅胶中浓缩，浓缩到原体积的1/10量，浓缩完毕后纯化。离心法...
...（NADP）， （2） 细胞色素 ， （3）氧，（4） 二硫键 ，（5）醌，（6）含氮化合物，（7）铁-硫 蛋白质 ，99及其他等（数字表示酶编号的第3位数字）。 受体分类 以氧为受体的称为氧化酶。尚有伴随着氧化而脱羧的酶，或产生的 羧酸 和 磷酸 结合成混合酸无水 化合物 的酶。它们都包括在氧化还原酶中。还有分别分类为以 过氧化氢 作为受体的 过氧化物酶 ...
...因。当人们用选择 培养基 （比如含有青霉素的培养基），来培养受体细胞时，能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源DNA，标记基因就起作用了。 2、“作为目的基因的 细胞定位 工具”举例：通过将可定位检测的标记基因（只要已知其序列，既可针对设计标记 探针 ，从而对其进行细胞定位）与目的基因进行连锁，当成功转化目的基因，该基因同时有成功表达后...
...性对照，以1%BSA取代一抗，其余步骤与 实验组 相同。 5、弃一抗和1%BSA，用0.01M PBS分别洗膜，5min×4次。 6、加入 辣根 过氧化物酶 偶联 的二抗（按合适稀释比例用0.01M PBS稀释），平稳摇动，室温2hr。 7、弃二抗，用0.01M PBS洗膜，5min×4次。 8、加入显色液，避光显色至出现条带时放入双蒸水中终止反应。 四、注...
...酶活力。 研究人员分离大鼠心、肝、肾、脑等脏器，在体外分别制成组织匀浆，随后测定蛇床子素大、中、小剂量作用前后各脏器匀浆吸亮度值，计算其脂质过氧化产物丙二醛（MDA）生成抑制率，以代替脂质过氧化抑制率。另外，他们还以二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）比色法测定蛇床子素不同剂量（15毫克·千克·天-1和7.5毫克·千克·天-1）灌胃前后小鼠全血中谷脱甘肽过氧化物酶...
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