一、标本制作
(1)组织切片脱蜡入水,0.01mol/l pH7.4 PBS洗; (2)用4%正常 羊血 清封闭组织37℃ ,30min。 (3)分别以第一抗体孵育组织,4℃24h,PBS振洗10min×3; (4)用胶体铁标记的第二抗体37℃孵育30min或用桥抗联接胶体铁标记物; (5)蒸馏水洗; (6)以1%的亚铁氰化钾与1%盐酸混合液显色20in; (7)自来水洗
肝内存在的 枯否细胞 (Kupffercells,KC)实际是位于肝窦内的 巨噬细胞 ,此类 细胞 的特点是其内质网及 核膜 上的内源性 过氧化物酶 活性。KC除具有吞噬、消灭病原 微生物 、清除机体内的 内毒素 、调节 免疫 和 炎症反应 等功能外,还能调控组织和 基质 修复、调控 肝细胞 、肝储 脂细胞 的 增殖 和合成细胞外基质等。这些功能是通过枯否细...
化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定(chemiluminescentimmunoassay,CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。用作标记的化学发光剂应符合以下几个条件:①能参与化学发光反应;②与抗原或抗体偶联后能形成稳定的结合物试剂;③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力;④应不改变或极少改变被标记物的理化特性,特别是免疫活性...
免疫细胞化学(Immunocytochemistry)又称免疫组织化学(Immunohistochemistry)是组织化学的分支,它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行细胞和组织原位的检测技术。Coons及其同事们于1941年首次用荧光素标记抗体检测肺组织内 肺炎 双球菌获得成功,开创了细胞化学中“免疫细胞化学”这一新篇章 。免疫...
...细胞颇为相似。此外小鼠也是研究LC的一种常用实验动物,其LC的许多表面标记与人LC相似。 现今认为,皮肤是一个具有独特免疫功能的器官,与机体免疫系统密切相关。而LC有多种免疫功能。除上述与免疫相关的一些表面标记外,LC能摄取,提呈抗原,具有同种异基因刺激作用,还可分泌白介素1等细胞因子。LC在接触 性变态 反应和移植排斥过程中均起重要作用。 免疫细胞化学技术...
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1.氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下: 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化...
当人们发现T淋巴细胞有杀伤肿瘤细胞之后,曾致力于被动输入淋巴细胞,但是输入一般胸腺细胞,效果不甚明确,自1976年以来,开始用淋巴因子,特别是用白介素刺激淋巴细胞增生以来,有很大发展。 LAK细胞 LAK细胞是淋巴因子激活杀伤细胞(lymphokine acitvated killer)的简称,1976年,morgan发现丝裂原刺激的淋巴细胞培养上清液中存在...
免疫细胞主要有淋巴细胞(包括T淋巴细胞、B淋巴细胞)和巨噬细胞。实际上,除了以上三种细胞外,血液中所有的细胞都与免疫有关,包括红细胞、嗜中性白细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞、血小板等,另外还有一种自然杀伤细胞,又称NK细胞,属于第三群淋巴细胞。这些细胞有多种多样的功能,免疫应答时可以由细胞直接发挥作用如吞噬、杀伤异物,也可以在抗原刺激下产生蛋白质类的免疫分...
免疫金银技术(Immunogold—sliver Technique)是在免疫金基础上发展的新兴的先进的免疫细胞化学检测技术,它比免疫荧光,免疫酶标技术有许多独特的优点。 1.制备方法简单,易行。 2.标记简单 抗体、凝集素、酶、SPA、激素等很容易通过物理吸附作用与胶体金颗粒相结合形成稳定的金标复合物。由于在标记过程中不需要经过任何化学方法交联,抗体的生物...
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