为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性,排除某些非特异性染色,必须在初次试验时进行以上对照试验: 1.直接法 需设下述对照试验 (1)标本自发荧光对照:标本只加PBS或不加PBS,缓冲甘油封片,荧光显微镜观察应呈阴性荧光(无与特异性荧光相似的荧光)。 (2)抑制试验:可分为二步法和一步法。 ①二步抑制法:标本先加未标记的特异性抗体,再加标记荧光抗体,结果应呈阴...
用各种方法提纯单一成分的抗原是产生单价特异性抗体的最主要条件。近代免疫化学技术(免疫吸收法)和柱层析法等提供了很大的可能性,可参考有关专着。
...说明书),用微量加样器每份标本加1孔。加样量10μl。置湿盒(水平位置)37℃扩散24h,测沉淀环直径,如图18-2所示。 图18-2 单向免疫扩散图(0.8%琼脂糖) 4. 标准曲线的制备(参考方法) (1)参考血清稀释法:取Apo含量标准参考血清用盐水稀释成梯度浓度。ApoAⅠ:20、40、60、80、100mg/dl,同上法操作加样,每一稀释浓度应在两...
光化学与免疫法 (一)光化学治疗(puva) 补骨脂 素或其衍生物加紫外线可作用于表皮内与受损细胞邻近尚未完破坏或正常的黑素细胞,刺激这些细胞的功能,使酪氨酸酶催化黑素的合成,促进黑素细胞的分裂和移动,致使白斑的色素逐渐恢复。白斑的色素再生还常常始于毛球部黑素细胞的增殖,随后沿毛囊转移到漏斗部,最后在邻近角朊细胞内离心性扩散。可用 补骨脂 素(psorale...
由于IEF法需大型设备,工作量较大,极大地限制了该法的临床应用。免疫印迹法为目前检测ApoE表型最常用方法。此法直接用血清(或血浆)作为样品,脱脂后进行IEF电泳,然后用特异性多克隆或单克隆抗体进行免疫印迹反应,根据黑色后图谱即可确定ApoE表型。此法比IEF法更省时、简便、准确。 1.仪器与试剂 电泳仪,垂直板式电泳槽,转移电泳槽,NC膜;主要试剂有:⑴3...
...白质作为抗原注入另一种动物体内,则产生与该抗原相应的 特异性抗体 ( 免疫球蛋白 );将抗体从 血清 中提出后,结合上某种 标记物 ,即成为标记抗体。用标记抗体与 组织切片 标本 孵育,抗体则与细胞中相应抗原发生特异性结合,结合部位被标记物显示,则在 显微镜 下观察到该肽或蛋白质的分布。用 荧光素 (常用异硫氰酸)标记抗体,并于 荧光显微镜 下观察,称 免疫...
...后,关闭电源,置凝胶板于10.0%三氯醋酸液固定15~20min,取出胶板,在黑色背景灯光下量取沉淀峰高度,如图18-3所示。 图18-3 免疫火箭琼脂糖电泳图 7.计算 (1)查标准曲线。 (2)按下式计算: 8.如果需要也可将凝胶板置0.9% NaCl液漂洗过夜更换蒸馏水漂洗,底板衬以硬薄膜,尔后置染色液染色,脱色后可见明显的沉淀峰,干燥,以便长期保存。
...说明书),用微量加样器每份标本加1孔。加样量10μl。置湿盒(水平位置)37℃扩散24h,测沉淀环直径,如图18-2所示。 图18-2 单向免疫扩散图(0.8%琼脂糖) 4. 标准曲线的制备(参考方法) (1)参考血清稀释法:取Apo含量标准参考血清用盐水稀释成梯度浓度。ApoAⅠ:20、40、60、80、100mg/dl,同上法操作加样,每一稀释浓度应在两...
光化学与免疫法 (一)光化学治疗(puva) 补骨脂 素或其衍生物加紫外线可作用于表皮内与受损细胞邻近尚未完破坏或正常的黑素细胞,刺激这些细胞的功能,使酪氨酸酶催化黑素的合成,促进黑素细胞的分裂和移动,致使白斑的色素逐渐恢复。白斑的色素再生还常常始于毛球部黑素细胞的增殖,随后沿毛囊转移到漏斗部,最后在邻近角朊细胞内离心性扩散。可用 补骨脂 素(psorale...
非同位素标记物很多例如:生物素(biotin),地高辛(Digoxigenin),汞(mercury),溴(bromine)和碱性磷酸酶等,其中目前应用最多的是生物素和地高辛。将此法与免疫组化PAP法或ABC法联合使用,能成功地显示一些神经肽mRNA和神经肽的共存与共同分布。向正华等发现碱性磷酸酶抗地高辛抗体是经 木瓜 蛋白酶处理的,只有抗体的Fab段没有F...
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