....5%的蔗糖PBS（0.05mol/l pH7.2），4 ℃ 中漂洗，换数次固定液，过夜。 （2）随后，作10～40μm的冰冻切片，放入第一抗体血清作用12～18h，4℃，用含蔗糖的PBS洗数次。 （3）置于HRP标记抗体液（第二抗体）4 ℃ 过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜。 （4）2.5%戊二醛（pH7.4磷酸缓冲液）再固定1h...
...min。 （3）切片用PBS洗2次，每次5min。用电磁搅拌或振荡帮助洗净不参与反应的血清蛋白。吹干。 （4）滴加抗人IgG或γ-球蛋白荧光抗体（用0.01%伊文氏蓝稀释）覆盖切片，37 ℃ 中放置30min。 （5）用PBS洗2次，方法同步骤（3），随后，再用蒸馏水洗1min。 （6）缓冲甘油（pH9.0～9.5,PBS或碳酸盐缓冲液1份和1份甘油混合）封...
Roitt等（1956）和Witebsby等（1957）就发现桥本氏病 人血 清中有对甲状腺提取的抗体活性，后来White（1957）首次用间接免疫荧光染色方法研究桥本氏病人血清存在对甲状腺胶质（thyroidcolloid）的抗体获得成功。此后，Landing等（1958）和Holbrow等（1959）以不固定的甲状腺切片作抗原。检查出慢性甲状腺炎（Chr...
...min。 （3）切片用PBS洗2次，每次5min。用电磁搅拌或振荡帮助洗净不参与反应的血清蛋白。吹干。 （4）滴加抗人IgG或γ-球蛋白荧光抗体（用0.01%伊文氏蓝稀释）覆盖切片，37 ℃ 中放置30min。 （5）用PBS洗2次，方法同步骤（3），随后，再用蒸馏水洗1min。 （6）缓冲甘油（pH9.0～9.5,PBS或碳酸盐缓冲液1份和1份甘油混合）封...
... 碱基配对 规则的一种结合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测，必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记，这条链就称为核酸 探针 。因此，核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。 放射性同位素 标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高，信号强，所以最常用。放射性...
1．组蛋白的提取方法取大白 鼠肝 40g加入160ml0.01mol/l Ph7.4 Tris HCl缓冲液，制成匀浆后进行浓度梯度离心（27000rpm×60min），沉淀物中加入蒸馏水90ml，再以超声粉碎仪将细胞打碎，离心（3000rpm×15min）取上清液，再加入一定量的1mol/l 硫酸，使硫酸的最终浓度为0.2mol/L,混匀后，离心（3000...
遗传标记是指在遗传分析上用作标记的 基因 ，也称为 标记基因 。在 重组 实验中多用于测定重组型和双亲型。作为标记基因，其功能不一定研究得很清楚但应 突变 性状是明确的，所以容易测定。对于微生物虽多用与生化性状有关的基因，但对高等生物则多用与形态性状有关的基因。也有用着丝粒作为遗传标记的。在微生物遗传学中遗传标记还区分为选择性标记（或称选择性基因）和非选择性...
动物在实验前常常需要作适当的分组，那么就要将其标记使各组加以区别。标记的方法很多，良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用的要求。 常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。 （一）颜料涂染 这种标记方法在实验室最常使用，也很方便。使用的颜料一般有3-5%苦味酸溶（黄），2%硝酸银（ 咖啡 色）溶液和0.5%中性品红（红色）等。标记时用毛笔或棉签...
自旋标记 spin label 自旋标记 spin label 很多物质的 分子 不表现 电子自旋共振 （ESR），但对这些分子，人工地使之与 自由基 （free radical）结合从而得以用ESR法来研究，获得独特的ESR信息，这就是 自旋标记法 。因自由基有不成对电子自旋，所以称自旋标记（H．M．McConnell）。开始是用 氯丙嗪 阳离子自由基研究...
Friou等（1957）首先用免疫荧光细胞化学技术检查 系统性红斑狼疮 病 人血 清中的抗核抗体后，随后，在多种自身免疫性疾病的诊断中，广泛应用了免疫细胞化学方法，为这类疾病的诊断和研究提供了重要的依据。 所谓自身免疫性疾病是指自身免疫反应引起组织损伤的疾病。在临床方面，有的自身免疫性疾病已明确是自身抗体直接作用于自身抗原产生的自身免疫应答所致；有的则难以证...
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