一、斑点-ELISA
以常用荧光素作为标记物的荧光免疫测定往往受血清成分、试管、仪器组件等的本底荧光干扰,以及激发光源的杂射光的影响,使灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定(timeresolvedfluorescenceimmunoassay,TR-FIA)是针对这缺点加以改进的一种新型检测技术。其基本原理是以镧系元素铕(Eu)螯合物作荧光标记物,利用这类荧光物质有长荧光寿...
胃内容物误吸入肺对接受机械通气治疗并进行管饲给养的病人来说是一个常见而又严重的临床问题。据美国科研人员一项新的研究发现,胃蛋白酶免疫测定可能有助于准确监测这样的误吸发生。 目前已经研究出较多检测有无肺脏误吸发生的方法,但是常用的染色和葡萄糖检测法分别由于敏感性和特异性较差而引起人们质疑。另外,以前胃蛋白酶测定方法的临床有效性也不明确。 为此,圣路易斯大学的N...
在电化学发光免疫测定(electrochemluminescenceimmunoassay,ECLI)中应用的标记物为电化学发光反应的底物三联吡啶钌,其衍生物N-羟基 琥珀 酰胺(NHS)酯可通过化学反应与抗体或不同化学结构的抗原分子结合,制成标记的抗体或抗原。ECLI的测定模式与ELISA相似,分二个步骤进行。以双抗体夹心法测定抗原为例,第一步在试管中进行...
(一)肾小球疾病发病机制的研究 应用免疫荧光或免疫酶标技术,可对肾小球内免疫复合物沉积的机制、补体系统的激活途径、凝血机制的启动等进行研究,兹分述如下: 1.免疫复合物的形成及沉积的机制 有下列三种情况: (1)抗原及抗体在血液循环中结合形成循环免疫复合物沉积于肾小球:常见于毛细血管内增生性肾小球肾炎,抗原(如链球菌、 葡萄 球菌等)侵入人体后,免疫系统产生...
...Ab * Ag中的标记物 * 失去其特性,例如酶失去其活力,荧光物质不显荧光,则不需要进行Ab * Ag与Ab * 的分离,可以直接测定游离的Ab * 量,从而推算出标本中的Ag含量,这种方法称为均相法。 在异相法中,抗原和抗体如在液体中反应,分离游离和结合的标记物的方法有好多种。与放射免疫测定相类似的液相异相酶免疫技测定,在某些激素等定量测定中也有应用。但...
2001-2003年期间,国内有一些企业和科研机构研发了一批纤维素酶应用于中药制药的技术与产品,并获得了国内专利,但为数不多。纤维素酶主要应用于中药有效成分地提取与制作,在这些专利中,除了仅采用纤维素酶外,还采用了纤维素酶与另一种或几种酶组成的复合酶类酶解中药,如应用纤维素酶、果胶酶、葡萄糖异构酶、淀粉酶、脂肪酶组成复合酶,对中药进行酶解,以提高有效成分提取...
从广义上说,任何一种可以测定反应物变化速度的分析技术,不论是经典的比色法、容量法,还是现代的仪器分析技术都可用来测定 酶活性 浓度,但从历史和发展来看,主要还是使用分光亮度法和量气法。
引言中已强调了仅在一定条件下 酶反应 速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么?这些条件之间有无主次关系?如何选择合适的测定条件?这些都是实验室工作者在设计或选择测 酶活性 浓度方法时必须面对的问题。 首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下: 式中Kp可看成为ES的 解离常数 .Michaclis和Ment...
一、原理 应用比色分析测定溶液中伯的含量有 硫氰酸盐 显色法、磺基 水杨酸 法及邻菲罗啉显色法等各各种方法。现以磺基水杨酸法为例介绍铁的含量测定。 在不同酸度下,Fe3+和磺基水杨酸生成组成不同的配合物。若控制溶液PH值在8-11.5的条件下显色,可生成 配位数 为6的黄色三磺基水杨酸合铁配合物。反应式如: 上式可简写为 溶液的最大吸收波长λmax=420n...
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