胶体金双标记技术(常用为蛋白A—胶体金)_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

1.单面法 以不同直径的金粒分别标记两种不同的抗体,以间接法先染第一种抗体,洗净后再染第二抗体。 2.双面法 以不同直径的金粒标记的抗体于镍网的两面分另进行免疫染色。本法的优点是可防止两种金标记的抗体的相互干扰,又可防止第一次应用的一抗与其相应的抗原相结合,占据了空间,第二次应用的抗体没有适合的空间使之与相应的抗原相结合。 3.异种动物抗原—抗体染色法 如一...

http://qihuangzhishu.com/969/206.htm

胶体金标记物的制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

胶体金标记蛋白质的原理,一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时,蛋白质呈电中性,此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小,但蛋白质分子的表面张力却最大,处于一种微弱的水化状态,较易吸附于金颗粒的表面,由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带...

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免疫电镜胶体金标记法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨。因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展...

http://qihuangzhishu.com/969/199.htm

胶体金的制备方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

胶体金溶液的制备有许多种方法,其中最常用的是化学还原法,基本的原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子变成金原子。目前常用的还原剂有:白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、 枸橼 酸钠、鞣酸等,下面分别介绍制备不同大小颗粒的胶体金溶液。

http://qihuangzhishu.com/969/117.htm

制备胶体金的准备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一) 玻璃 器皿的清洁 制备胶体金的成功与失败除试剂因素以外玻璃器皿清洁是非常关键的一步。如果玻璃器皿内不干净或者有灰尘落入就会干扰胶体金颗粒的生成,形成的颗粒大小不一,颜色微红、无色或混浊不透明。我们的经验是制备胶体金的所有玻璃器皿先用自来水把玻璃器皿上的灰尘 流水 冲洗干净,加入清洁液(重铬酸钾1000g,加入浓硫酸2500ml,加蒸馏水至10000m...

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胶体金_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...质点的大小不同,可将分散体系分为三类。 (一)离子分散体系 指分数散相以小分子或离子状态分散着。这种溶液具有高度稳定性,无论放置多久,分散相颗粒都不会因重力而下沉,不会从溶液中分离出来。 (二)胶体分散体系 是指分散相颗粒在1~100nm之间的分散体系叫做胶体分散系。胶体溶液外观透明不浑浊,在普通显微镜下看不见它的分散相粒子,不易受重力影响与分散介质分离沉降...

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胶体金pH值的调整_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(PI)略偏碱的条件下二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK 2 CO 3 ,需要降低胶体金的pH值时可用0.1n HCl。测定金溶液的pH可能损害pH测定计的探头,因此,一般用精密的pH试纸测定其pH...

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胶体金的一般性状_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

(一)胶体金的颜色 溶胶的颜色决定于分散相物质的颜色、分散相物质的散度和入射光线和种类,是散射光还是透射光,粒子越小,分散度越高,则散射光的波长越短,对同一种物质的水溶胶来说,粒子大小不同,颜色亦不同,胶体金颗粒在5~20nm之间,吸收波长520nm,呈 葡萄酒 红色,20~40·nm之间吸收波长530nm,液体为深红色,60nm的金溶液主要吸收波长600n...

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红细胞平均直径和红细胞直径曲线测定_《临床基础检验学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

红细胞直径一般用测微器在显微境下直接测定。由于每个红细胞的直径并不完全相同,因此必须测定500个红细胞的直径,才能求出红细胞平均直径。根据红细胞直径数据绘制出红细胞大小分布的曲线,称为Price—jones曲线。正常人及不同病因P-J曲结特点见图2-4。 图2-4 红细胞大小分布曲线 [方法学评价] 红细胞直径测定简单易行,不需特殊设备,对 贫血 的鉴别诊断...

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