...与 胃癌 的关系也越来越受到学者们的重视。诊断Hp感染的方法已有很多,其缺点是不够敏感,因此,需要一种快速、可靠,具有高度敏感性的检测方法。聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)用于检测Hp感染国外已有报道,国内也有人用此方法检测唾液中的Hp。本文报道了用PCR技术从胃粘膜活组织中检测Hp,并探讨该方法在Hp感染的诊断和在...
polymerase 系专司 生物催化 合成 脱氧核糖核酸 ( DNA )和 核糖核酸 ( RNA )的一类酶的统称。 可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA 聚合酶 ;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在 真核生物 中已被发现的就有三...
早在1956年Kornberg等就从大肠杆菌提取液中发现了DNA聚合酶,并且得到了DNA聚合酶Ⅰ纯品。DNA聚合酶Ⅰ是由分子量为109000的一条多肽链构成,此酶可被枯草杆菌蛋白酶分解为两个片段,一个片段分子量为76000,有聚合酶活性,并有3’→5外切酶活力,即Klenow片段(Klenow fragment)。另一个片段分子量为34000,具有5’→’3...
(DNa polymerase)的作用是将1个脱氧三磷酸核苷酸加到引物(primer)的3’-OH上,释放出一个焦磷酸分子(ppi),如下式表示。 聚合酶主要有以下几种: 1.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大肠杆菌DNA聚合酶(E.ColiDNA polymerase)主要有3种作用:①5’→3’的聚合作用。但不是复制染色体而是修补DNA,填补DNA上的空隙或是切除...
RNA聚合酶 ( RNA polymerase 、 RNAP 、 RNApol 、 DNA-dependent RNA polymerase , EC 2.7.7.6)或称 核糖核酸 聚合酶 ,是一种负责从 DNA 或 RNA 模板制造RNA的酶。RNA聚合酶是通过称为 转录 的过程来建立RNA链,以完成这个工程。在科学上,RNA聚合酶是一个在RNA 转录本...
应用探针DNA上的一个片段作为DNA引物,以环化探针DNA的重组质粒DNA为模板,在DNA聚合酶的作用下,通过变性,退火和延伸过程,使探针DNA得到标记。反应在0.5ml离心管内进行,总体积为25μl,内含50mmol/l Tris—HCl pH7.5, 10mmol/L MgCl 2 、BSa 5mmol/L、80ng引物DNA和0.1μg连接的DNA或0...
(一)概述 基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础,在核酸水平检测 人类 遗传性疾病的基因缺陷和一些 传染病 病原体的方法。其基本过程是:制备DNA探针,标记探针,检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来标记探针DNA。近年来,非同位素标记方法发展很快,已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法,是...
真核和原核细胞内都存在有DDRP,迄今发现的DDRP的有以下特点:①以DNA为模板;在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板,这条链叫做模板链(templatestrand),又叫做无意义链。DNA双链中另一条不做为模板的链叫做编码链,又叫做有意义链,编码链的的序列与转录本RNA的序列相同,只是在编码链上的T在转录本RNA为U,由于RNA的转录合成是以...
取HBV质粒DNA0.5μg,DNase I(SABC)2pg, 10×NBTμl,三蒸水补足体积至10μl,37℃,15min;加5mmol/l dATP dGTP dCTP Bio –11- dUTP各2μl,10×NBt 4μl,三蒸水补足体积至10μl,37℃,15min;三蒸水补足体积至49μl,DNA聚合酶i 5u,混匀,14℃过夜,加0.5mm...
酿酒酵母 的 RNA聚合酶Ⅱ 包含有12个 亚基 [1] 。 RNA聚合酶Ⅱ ( 英语: RNA polymerase II ,亦被称为 RNAPⅡ 或 PolⅡ )是一个存在于 真核生物 细胞 中的酶。它 催化 脱氧核糖核酸 转录 ,合成mRNA及大多数snRNA和 微RNA 的 前体 [2] [3] 。RNA聚合酶Ⅱ是含12个亚基的550kDa大的 复合...
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