反转录酶（Reverse transcripatase）是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。这种酶需要镁离子或锰离子作为辅助因子，当以mRNA为模板时，先合成单链DNA（ssDN...
...8.0终止显色。 （22）甘油 明胶 直接封片。 结果：杂交阳性部位着蓝黑色。 组织处理及预杂交所用器皿需高温消毒，实验者需戴手套。 （三）酶促生物素标记cRNA探针的应用 基本方法和放射性标记cRNA探针同，所不同的是探针浓度为2.5μg/μl。显示探针反应步骤如下。 （1）用PBS冲洗粘附有切片的载片2×3min。根据情况也可用漂洗法。 （2）将载片浸入...
大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ（exonucleaseⅢ）是从带3’-OH末端的双链DNA，按3’→5’方向切除5’单核苷酸： 大肠杆菌核酸外切酶Ⅶ则是从单链DNA的3’端和5’端切除寡核苷酸（两种形式）： （1）（2） 前一种酶需要镁离子作辅助因子才有活性；后一种酶则不需镁离子，因此即使在有螯合剂EDTA的情况下也有活性。另一种从噬菌体λ感染的大肠杆菌中提取的λ核酸...
... 3．0.06% Pronase 试剂：Pronase 0.06g 0.05mol/L TB(pH7.5) 100ml 配制方法：同前。 在免疫细胞化学染色中，有时经Formalin过度固定的标本，常会产生过量的醛基，遮盖抗原，影响一抗与抗原的结合。用蛋白酶溶液消化，可起到暴露抗原部分的作用。消化时间应根据不同组织而异，总之，在保持组织形态不被破坏的前提下，...
在 血吸虫病 的免疫学诊断中，除试用过几乎所有的各种免疫学检验方法。此外，还有以血吸虫尾蚴和虫卵作为抗原的尾蚴膜试验和环卵沉淀试验。现介绍敏感性、特异性较高且使用广泛的酶联免疫吸附试验。
在 血吸虫病 的免疫学诊断中，除试用过几乎所有的各种免疫学检验方法。此外，还有以血吸虫尾蚴和虫卵作为抗原的尾蚴膜试验和环卵沉淀试验。现介绍敏感性、特异性较高且使用广泛的酶联免疫吸附试验。
...内将1微摩尔的 底物 转化为产物的酶量定为1个单位，称为标准单位。并规定了酶作用的条件，因标准单位在实际应用时不够方便，故生产上往往根据不同的酶制定各自的酶活力单位，例如 蛋白酶 以1分钟内能水解 酪蛋白 产生1微克 酪氨酸 的酶量为1个蛋白酶单位； 液化 型 淀粉酶 以1小时内能液化1克 淀粉 的酶量为1个单位，等等。在测定酶活力时，对反应温度、PH值、底...
采用酶偶联法测定酶活性浓度时，反应体系必须加入指示酶，有些方法还加用辅助酶，在选择或设计此类方法时，必须考虑合适的酶和浓度，有关问题将在后面“连续监测法酶活性浓度”一节中详加讨论。
以氰化高铁血红蛋白为底物测定NADH-MetHb还原酶活性，或以二氯酚靛酚为底物测定黄递酶活性，或以细胞色素b5为底物测定b5R活性。需强调指出的是，由于不同遗传变异型的作用机制不同，试管中(高底物浓度下)测定的结果并不能确切地反映在活细胞内(低底物浓度下)催化效率减低的程度。因为，如果酶分子结构的改变使其与底物NADH的亲和力减低(Km值增大)，在生理情况...
酶在正常和 病理 代谢 中起着重要作用，因此酶的测定是医学实验室的一项重要工作，在医学研究和 医院 常规工作中都要进行大量酶的测定。但要作好酶的测定不是一件很容易的事，因为它有很多与其它定量测定不同或独特之处，作好酶的测定除了必须掌握一般分析技术知识外，还须了解酶测定的特点、方法分类和各类方法的优缺点，然后根据各自实验室情况、研究目的和临床需要，才能设计和应...
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