根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应的方式，间接凝集反应可分为4类： 1．（正向）间接凝集反应用抗原致敏载体以检测标本中的相应抗体（图13-1）。 图13-1（正向）间接凝集反应原理示意图 2．反向间接凝集反应用特异性抗体致敏载体以检测标本中的相应抗原（图13-2）。 图13-2反向间接凝集反应原理示意图 3．间接凝集抑制反应诊断试剂为抗原致敏的颗粒载体...
...7.4缓冲液，22℃，25min，同上过Sephadex G-50，收集蛋白A峰。 （3）取0.77mg/ml的PE和0.27mg/ml蛋白A等量混合，22℃反应6h，混合物4℃保存备用。 以上两种PE标记制品，可最后溶于0.01mol/l pH7.4PB(含有0.1mol/l DETA、1mol/L碘乙酰胺、1%BSA 和0.1%NaN3),0～5℃保存。
自身红细胞凝集试验（autologousred cell agglutination assay）与一般间接血凝试验不同之处为反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜红细胞。主要试剂材料为抗人O型红细胞的单克隆抗体，这种抗体能与不论何种血型的红细胞结合，但不引起凝集反应。这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗体可用于检测标本中的抗原；如与特异性抗原连接，则可用...
...至48μl，加DNA聚合酶（SABC）8u，混匀，37 ℃ ，2h，加0.5mol/l EDTA(Ph8.0)2μl，终止反应。 在随机引物标记体系中，加入不同梯度浓度比值的Bio-11-dUTP/dTTP(%)，发现二者比值明显影响探针标记率和显色灵敏度。Bio-11-Dutp/dTTP（%）比值为35%时，其标记率最高，显色灵敏度达0.2pg，杂交灵敏度...
当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后便可进行标记。具体步骤如下： （1）根据用以标记的胶体金的总量计算出所需要的待标记蛋白质的总量。 （2）在电磁搅拌下，将蛋白质溶液加入胶体金溶液中（pH已调至PI超过0.5pH），加入蛋白质时应逐滴加入，1mg的蛋白质大约5min加完。 （3）在磁性搅拌下加入5%的 牛血 清白蛋白（BSA）使其终浓度为1%，或...
单克隆抗体技术 (monoclonal antibody technology)，20世纪后期 免疫学 技术的重大突破，应用 B细胞 杂交瘤 技术产生 单克隆抗体 (McAb)。 B细胞杂交瘤是 免疫 的小鼠 脾细胞 （ B淋巴细胞 ）与小鼠 骨髓瘤 （一种 浆细胞瘤 ， 浆细胞 是B淋巴细胞系的终末形式） 细胞融合 而成的 杂交细胞 ，其核内含有双亲 细胞...
...，敏感度也较高。但自生物素和高辛标记探针技术建立后，已有取而代之的趋势。生物素标记探针技术是Brigat（1983）首先建立的，它利用生物素标记的探针在组织切片上检测了病毒DNA，通过生物素与抗生物素结合，过氧化物酶-抗过氧化物酶显示系统显示病毒DNA在细胞中的定位。生物素标记探针技术目前已被广泛应用，特别是在病毒学和 病理学 的临床诊断中。这种生物素标记技...
...见光照射下，芳基叠氮化合物可能变成活化芳基硝基苯，很易与DNA或RNA的腺嘌呤N—7位置特异结合，大约每50个碱基结合一个生物素，所以只用于标记大于200个核苷酸的片段。光敏生物素的醋酸盐很易溶于水，与核酸形成的共价结合很稳定。此法有以下优点：方法简便易行，快速省时，不需昂贵的酶和dUTP等；只需光照，探针稳定，-20℃可保存12个月以上。适用于DNA和RN...
（1）透析除盐：蛋白质溶液内应除去多余的电解质，不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位，影响蛋白质的吸附，因此，标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水（0.005mol/l NaCl , pH7.0）透析。 （2）去除蛋白质中的沉淀：长期低温保存的蛋白质或4 ℃ 较长时间保存的抗体，特别是在浓度高于2mg/...
70年代以来，由于免疫组织化学方法的广泛应用，在技术方法上不断得以改进，涌现了一批新的技术方法，其特点为一些具有双价或多价结合力的物质如如植物凝集素（Lectin）、生物素（Biotin）和 葡萄 球菌A蛋白（Staphylococcal Protein A, SPA）等被应用于免疫细胞化学技术，从而建立了SPA—HRP法、ABC法、BRAB法和LAB法等。...
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