1.杂交膜的选用杂交膜是一种多孔、表面积很大的固相载体,核酸一旦固定在上面,就可用杂交法进行检测。最常使用的膜是硝酸纤维素膜,用于放射性和非放射笥标记探针都很方便,产生的本底浅,与核酸结合的化学性质不是很清楚,推测为非共价键结合。经80℃烤干2h和杂交处理后,核酸仍不会脱落。硝酸纤维素膜的另一特点是只与蛋白有微弱非特异结合,这在使用非同位素探针中尤为有用。硝...
...光镜下癌细胞分散浸润,无法确定其转移及浸润范围。用免疫荧光或免疫酶技术进行染色,根据阳性细胞分布可作出正确判断。在肝脏或其它部位转移癌有时因细胞分化不良,无法确定其组织来源。如果用免疫细胞化学染色,发现CEA阳性细胞说明来源于腺上皮的癌肿,可能来自胃肠道或卵巢等组织。用胸 腹水 进行免疫细胞化学染色对临床诊断有实用价值。Walts对26例肿瘤病人渗出液和抽吸...
...mistry Techniques in Immunocytochemistry, 1983;2:217~218 3. 蔡文琴,王泊沄主编.实用免疫细胞化学.成都:四川科技出版社,1983 4.HolgateCS, et al .Immunogold –sliver staining new method of immunostaning withenhan...
1.汪美先.免疫学基础.西安:陕西科学技术出版社,1983;9 2.夏宗勤.实验核医学与核医学.上海:同济大学出版社,1989;1 3.放射免疫测定基础.天津:天津科学技术出版社,1985;8 4.李振甲,韩春生,王连勋.实用放射免疫学.北京:科学技术文献出版社,1989;5 5.李振甲,王仁芝.激素的放射免疫分析.北京:科学技术文献出版社,1985 6.赵...
由甲状腺滤泡旁细胞(C细胞)产生的恶性肿瘤。此瘤在光镜下与甲状腺 非典 型腺瘤、未分化癌及转移癌有时难以鉴别。免疫细胞化学染色可见瘤细胞降钙素阳性反应,降钙素免疫反应物常聚积于瘤细胞核周胞浆中,此项检查具有诊断意义。电镜下,瘤细胞中可见二种分泌颗粒,I型颗粒直径约280nm,含有等电子密度的基质,紧邻界膜:II型颗粒直径约130nm,有致密核,由空晕与界膜相...
...ln Microbiol, 1986;23:297 5. 白薇 静国忠. 应用点杂交技术对乙型 肝炎 病毒基因组进行定量分析.中华微生物学和免疫学杂志,1990;10:174 6.马立人刘耀清.光敏生物素核酸探针标记和检 测试 剂盒使用说明.军事医学科学院放射医学研究所,1989:6 7.马风林.生物素标记核酸探针技术.生物化学与生物物理进展,1989;16...
...A和细胞壁的肽聚糖呈共价结合。抗二甲氧基苯青霉素突变株(Methicillin—resistant strain)能产生分泌性SPA,它较之细胞壁所含的SPA在免疫学性质上相似,但易分离,损失少。 (2)SPA为蛋白质成分,仅含少量或不含碳水化合物,其分子量因提取方法不同而异,用脱氧核糖核酸酶消化细胞壁后超速离心或用加热油提法,所测分子量为12000~150...
放射性标记核酸探针在使用中的限制,促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展,在许多方面已代替放射性标记,推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术,即酶促反应标记法和化学修饰标记法。 酶促反应标记探针是用缺口平移法,随机引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程...
光敏生物素有一个连接臂,一端连接生物素,另一端有芳基叠氮化合物。在可见光照射下,芳基叠氮化合物可能变成活化芳基硝基苯,很易与DNA或RNA的腺嘌呤N—7位置特异结合,大约每50个碱基结合一个生物素,所以只用于标记大于200个核苷酸的片段。光敏生物素的醋酸盐很易溶于水,与核酸形成的共价结合很稳定。此法有以下优点:方法简便易行,快速省时,不需昂贵的酶和dUTP等...
根据标记物的不同,免疫细胞化学技术可分为免疫荧光细胞化学技术,免疫酶细胞化学技术,免疫铁蛋白技术,免疫金-银细胞化学技术,亲和免疫细胞化学技术,免疫电子显微镜技术等。近些年来,核酸分子原位杂交技术采用生物素、地高辛等非放射性物质标记探针,和免疫细胞化学技术密切结合,发展为杂交免疫细胞化学技术。不同的免疫细胞化学技术,各具有独特的试剂和方法,但其基本技术方法是...
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